[发明专利]一种铁皮石斛干细胞的培养方法及其应用

摘要

本发明属于生物技术领域，具体涉及一种铁皮石斛干细胞的培养方法及其应用。本发明铁皮石斛干细胞的培养方法具有分化明显、增殖快并且周期短的优点。制备的铁皮石斛干细胞具有明显的抗氧化和抗衰老活性，可以广泛的应用于药品、化妆品以及保健品领域。

主权项

1.一种铁皮石斛干细胞的培养方法，具体步骤如下：1)取切除根冠的铁皮石斛根尖，清洗，灭菌消毒；2)将步骤1得到的铁皮石斛根尖切成5mm小块，接种至筛选培养基上，培养温度为25‑29℃，避光培养5‑10天，获得形成层来源的铁皮石斛干细胞；所述筛选培养基为含有0.01‑0.5mg/L的6‑BA、0.01‑0.8mg/L的TDZ和0.01‑0.8mg/L的三十烷醇的B5培养基，3)将形成层来源的铁皮石斛干细胞转移至液态培养基中培养增殖；所述液态培养基为含有0.01‑0.5mg/L的6‑BA、5‑20mg/L的蔗糖、0.01‑0.8mg/L的甲基茉莉酮酸酯和0.01‑0.8mg/L的三十烷醇的B5培养基；4)将步骤3) 培养收集的形成层来源的铁皮石斛干细胞移入气升式生物反应器内扩大培养，培养液使用步骤3) 的液态培养液，在常温下不断搅拌；培养5天后过滤收获铁皮石斛干细胞。