[发明专利]重组质粒pNZ8048-plnD的构建方法在审

专利信息
申请号: 201510776933.4 申请日: 2015-11-12
公开(公告)号: CN105505965A 公开(公告)日: 2016-04-20
发明(设计)人: 顾青;郦萍;王小丰 申请(专利权)人: 浙江工商大学
主分类号: C12N15/66 分类号: C12N15/66
代理公司: 杭州中成专利事务所有限公司 33212 代理人: 冉国政
地址: 310012 浙*** 国省代码: 浙江;33
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摘要: 发明公开一种重组质粒pNZ8048-plnD的构建方法,以植物乳杆菌ZJQ基因组为模板,PCR扩增plnD目的基因,将扩增得到的基因片段用PCR产物纯化试剂盒纯化特异性扩增条带,将纯化后的PCR产物和质粒pNZ8048经NcoI和Hind III双酶切后纯化,16℃连接过夜,得到重组质粒pNZ8048-plnD。本发明构建的重组质粒pNZ8048-PlnD,能在植物乳杆菌ZJ316(缺乏调控蛋白PlnC和PlnD)中表达。该体系有助于研究和探讨PlnC在植物乳杆菌ZJ316中的转录调节机制,进而有助于揭示PlnD对植物乳杆菌ZJ316细菌素合成代谢调节机制,为植物乳杆菌ZJ316群体感应模式研究提供理论依据,也为植物乳杆菌ZJ316细菌素高产研究提供一种创新思路,在植物乳杆菌ZJ316细菌素的开发和商业运用上也具有十分重要的意义。
搜索关键词: 重组 质粒 pnz8048 plnd 构建 方法
【主权项】:
一种重组质粒pNZ8048‑plnD的构建方法,其特征在于以植物乳杆菌ZJQ基因组为模板,PCR扩增plnD目的基因,将扩增得到的基因片段用PCR产物纯化试剂盒纯化特异性扩增条带,将纯化后的PCR产物和质粒pNZ8048经NcoI和Hind III双酶切后纯化,16℃连接过夜,得到重组质粒pNZ8048‑plnD。
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