[发明专利]重组质粒pNZ8048-plnD的构建方法在审
申请号: | 201510776933.4 | 申请日: | 2015-11-12 |
公开(公告)号: | CN105505965A | 公开(公告)日: | 2016-04-20 |
发明(设计)人: | 顾青;郦萍;王小丰 | 申请(专利权)人: | 浙江工商大学 |
主分类号: | C12N15/66 | 分类号: | C12N15/66 |
代理公司: | 杭州中成专利事务所有限公司 33212 | 代理人: | 冉国政 |
地址: | 310012 浙*** | 国省代码: | 浙江;33 |
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摘要: | 本发明公开一种重组质粒pNZ8048-plnD的构建方法,以植物乳杆菌ZJQ基因组为模板,PCR扩增plnD目的基因,将扩增得到的基因片段用PCR产物纯化试剂盒纯化特异性扩增条带,将纯化后的PCR产物和质粒pNZ8048经NcoI和Hind III双酶切后纯化,16℃连接过夜,得到重组质粒pNZ8048-plnD。本发明构建的重组质粒pNZ8048-PlnD,能在植物乳杆菌ZJ316(缺乏调控蛋白PlnC和PlnD)中表达。该体系有助于研究和探讨PlnC在植物乳杆菌ZJ316中的转录调节机制,进而有助于揭示PlnD对植物乳杆菌ZJ316细菌素合成代谢调节机制,为植物乳杆菌ZJ316群体感应模式研究提供理论依据,也为植物乳杆菌ZJ316细菌素高产研究提供一种创新思路,在植物乳杆菌ZJ316细菌素的开发和商业运用上也具有十分重要的意义。 | ||
搜索关键词: | 重组 质粒 pnz8048 plnd 构建 方法 | ||
【主权项】:
一种重组质粒pNZ8048‑plnD的构建方法,其特征在于以植物乳杆菌ZJQ基因组为模板,PCR扩增plnD目的基因,将扩增得到的基因片段用PCR产物纯化试剂盒纯化特异性扩增条带,将纯化后的PCR产物和质粒pNZ8048经NcoI和Hind III双酶切后纯化,16℃连接过夜,得到重组质粒pNZ8048‑plnD。
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