[发明专利]用离子液体调控溶菌酶溶解度制备溶菌酶晶体的方法

摘要

本发明公开了用离子液体调控溶菌酶溶解度制备菌溶酶晶体的方法，包括以下步骤：(1)配制含NaCl的pH值为4～6的缓冲溶液；(2)加入水溶性咪唑基离子液体；加入鸡蛋清溶菌酶，使鸡蛋清溶菌酶在20～30℃下过饱和；(3)在搅拌下,将步骤(2)获得的液体冷却，过滤，晶体干燥，得溶菌酶晶体；4℃低温保藏。本发明充分利用离子液体对生物大分子分子间作用的影响来调控溶菌酶的溶解度，从而改变溶菌酶的溶解性，使溶解度增加量RM最高可达90％，该方法容易实现，操作方便。本发明所使用的水溶性离子液体有利于促进溶菌酶分子在三维空间的组装，有利于提高溶菌酶结晶率。本发明能提高收率，降低能耗，进而降低分离纯化成本。

主权项

用离子液体调控溶菌酶溶解度制备菌溶酶晶体的方法，其特征是包括以下步骤：(1)配制含NaCl的pH值为4～6的缓冲溶液，所述NaCl的质量含量为2％～5％；(2)向步骤(1)获得的缓冲溶液中加入水溶性咪唑基离子液体使质量终浓度为1％～5％；加入鸡蛋清溶菌酶，使所述鸡蛋清溶菌酶在20～30℃下过饱和比为1.5～4.5；(3)在搅拌速度为200～350rpm的条件下,将步骤(2)获得的液体以5～10℃/min的冷却速率降温至10～15℃并维持20～40min，然后2‑4h之内将温度降至3～5℃，并保持5～8h，过滤，晶体在‑40～‑50℃冷冻干燥，得溶菌酶晶体；4℃低温保藏。