[发明专利]一种针对肿瘤治疗的DNA超晶格纳米载药分子的制备方法

摘要

本发明涉及一种针对肿瘤治疗的新型DNA网状纳米载药分子的构建方法，通过DNA四面体与纳米金的复合形成一种纳米网状结构，包括DNA四面体（TDN）结构的制备、粒径为4nm的纳米金粒子的制备、DNA四面体（TDN）与金纳米粒子的结合。本发明中的DNA四面体大小和开关精确可控且性质极其稳定。本发明创造性地使用DNA与金纳米粒子将DNA四面体连接起来，形成了一个大型的网状结构。本发明主要以DNA为原料，对人体无害。因而本发明将有望在肿瘤的研究与治疗领域有极大的应用。

主权项

一种针对肿瘤治疗的DNA超晶格纳米载药分子的制备方法，其特征在于，包括以下步骤：（1）DNA四面体（TDN）结构的制备：将四条单链（50μM）分别取2μL加入到42μL Tris‑MgCl₂（Tris 10mM, MgCl₂ 50mM, pH8）溶液中并置于PCR仪内，将温度迅速升到95℃稳定10分钟再冷却至4℃稳定30分钟便可得到高产率的DNA四面体（2uM）；（2）粒径为4 nm 的纳米金粒子的制备：取10ml 浓度为2.5*10^‑4M的柠檬酸钠溶液放入50 ml圆底烧瓶中，加入28ul高氯酸（30mg/ml），最后在搅拌下加入0.3ml 新配制的硼氢化钠（0.1M）溶液，即得到粒径为4nm的纳米金溶液；（3）DNA四面体（TDN）与金纳米粒子的结合：取将400ul金纳米粒子离心用30K超滤管滤去多余的溶剂，取沉淀用100ul PBS（10mM pH7.4）溶解，然后加入2ul TDN(2uM），静置过夜；（4）DNA超晶格结构的合成：取1μL i‑motif的互补链加入上述溶液中，混匀并在PCR中60度反应10分钟并迅速降至37度保持2小时。