[发明专利]一种人表皮生长因子的制备方法及增加人表皮生长因子复溶性的药物组合物在审
申请号: | 201510806666.0 | 申请日: | 2015-11-21 |
公开(公告)号: | CN105399810A | 公开(公告)日: | 2016-03-16 |
发明(设计)人: | 刘乃山;林晓磊;刘翠珍 | 申请(专利权)人: | 青岛康原药业有限公司 |
主分类号: | C07K14/485 | 分类号: | C07K14/485;C07K1/36;C07K1/34;C07K1/30;C07K1/18;A61K38/18;A61K9/19;A61P17/02 |
代理公司: | 暂无信息 | 代理人: | 暂无信息 |
地址: | 266300 山*** | 国省代码: | 山东;37 |
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摘要: | 本发明公开了一种制备人表皮生长因子的工艺的方法研究。具体的说,就是以健康成年男性新鲜尿液为原料,经过超滤、等电点沉淀以及梯度洗脱法等现代蛋白质高端生化分离技术来制备人表皮生长因子,可以从10L尿液中,得到初步电泳纯的人表皮生长因子0.61mg。 | ||
搜索关键词: | 一种 表皮 生长因子 制备 方法 增加 复溶性 药物 组合 | ||
【主权项】:
一种人表皮生长因子的制备方法,其特征在于包括以下步骤:(1)超滤浓缩工序:取10L尿液,用50%NaOH调pH,静置1.5h,虹吸上清液,用冰醋酸调节PH值,静置0.5h,将上清液进行超滤浓缩至2L,之后再用冰醋酸调节PH值,最后放于4℃的环境中过夜;(2)蛋白质等电点沉淀工序: 上清液加(NH4)2SO4至饱和,4 ℃静置,离心后沉淀;(3)梯度洗脱工艺:用洗脱液 A溶解沉淀,搅拌、离心,留取离心液;用洗脱液 B平衡阴离子交换柱,将上述离心液上柱;用洗脱液B溶液洗脱柱子;收集洗脱液;洗脱液经超滤膜,超滤,得超滤液;(4)沉淀超滤液中加入乙醇沉淀,离心,固体再用无水乙醇脱水两次,离心,弃去上清液,留取沉淀物;(5)冻干将沉淀物装入盘进冻干机,冻干即得表皮生长因子。
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