[发明专利]乙型肝炎病毒八种基因亚型的鉴别检测方法及试剂盒

摘要

本发明公开了一种乙型肝炎病毒八种基因亚型的鉴别检测方法及试剂盒，其利用多重聚合酶链反应（PCR）结合液相芯片来快速定性和定量鉴别检测乙型肝炎病毒A~H八种基因亚型，选用了对各自扩增的病毒特异序列都有很高灵敏度的引物对，并设计了碱基成分合理的探针，提高了检测的灵敏度。本发明的技术方案在一次试验中可以鉴别包括乙型肝炎病毒的A~H八种基因亚型，具有通量大，特异性及灵敏度高，结果稳定，重复性好，操作简单，检测速度快的优点。

主权项

1.一种乙型肝炎病毒八种基因亚型的鉴别检测试剂盒，其特征在于该试剂盒包括用于检测下列乙型肝炎病毒基因亚型的探针：乙型肝炎病毒A基因型的探针HBV‑A‑P，其序列为SEQ ID NO：1 所示；乙型肝炎病毒B基因型的探针HBV‑B‑P，其序列为SEQ ID NO：2 所示；乙型肝炎病毒C基因型的探针HBV‑C‑P，其序列为SEQ ID NO：3 所示；乙型肝炎病毒D基因型的探针HBV‑D‑P，其序列为SEQ ID NO：4 所示；乙型肝炎病毒E基因型的探针HBV‑E‑P，其序列为SEQ ID NO：5 所示；乙型肝炎病毒F基因型的探针HBV‑F‑P，其序列为SEQ ID NO：6 所示；乙型肝炎病毒G基因型的探针HBV‑G‑P，其序列为SEQ ID NO：7 所示；乙型肝炎病毒H基因型的探针HBV‑H‑P，其序列为SEQ ID NO：8 所示；所述试剂盒还包括用于扩增下列乙型肝炎病毒基因亚型目的片段的PCR引物对：乙型肝炎病毒A基因型的引物对HBV‑A‑F和 HBV‑A‑R，其序列分别为SEQ ID No：9和SEQ ID No：10；乙型肝炎病毒B基因型的引物对HBV‑B‑F和 HBV‑B‑R，其序列分别为SEQ ID No：11和SEQ ID No：12；乙型肝炎病毒C基因型的引物对HBV‑C‑F和 HBV‑D‑R，其序列分别为SEQ ID No：13和SEQ ID No：14；乙型肝炎病毒D基因型的引物对HBV‑D‑F和 HBV‑D‑R，其序列分别为SEQ ID No：15和SEQ ID No：16；乙型肝炎病毒E基因型的引物对HBV‑E‑F和 HBV‑E‑R，其序列分别为SEQ ID No：17和SEQ ID No：18；乙型肝炎病毒F基因型的引物对HBV‑F‑F和 HBV‑F‑R，其序列分别为SEQ ID No：19和SEQ ID No：20；乙型肝炎病毒G基因型的引物对HBV‑G‑F和 HBV‑G‑R，其序列分别为SEQ ID No：21和SEQ ID No：22；乙型肝炎病毒H基因型的引物对HBV‑H‑F和 HBV‑H‑R，其序列分别为SEQ ID No：23和SEQ ID No：24。