[发明专利]一种农业根结线虫复合生防菌剂的制备方法及其应用

摘要

本发明涉及一种农业根结线虫复合生防菌剂的制备方法及其应用，该菌剂是由保藏号为CGMCC No.10026的淡紫拟青霉YT08经固体发酵获得的，其对农业根结线虫病害具有强抑制效果。本发明的固态发酵涉及优选的培养基：干啤酒糟17～30%，麸皮4～8%，花生壳粉碎物3～6%，大豆蛋白胨2～5%，粉末壳聚糖（90%以上的脱乙酰度）2.55～7.5%，蟹壳粉1～2.25%，NaCl 0.2～0.5%，CaCl20.1～0.3%，MgSO40.1～0.3%，FeSO40.05～0.15%，含水量为40～70%。本发明中的制备方法具有原料成本低、易于操作控制、产品功效强和适合工业化生产等特点。

主权项

1.一种农业根结线虫复合生防菌剂的制备方法，其特征在于，是由保藏号为CGMCC No.10026的淡紫拟青霉YT08经固态发酵后获得的，该菌剂对农业根结线虫病害具有强抑制效果，其制备方法包括如下步骤： （1）菌种活化：从试管斜面保藏菌种中挑取1环接种于活化培养基中，在28～30℃、200 rpm下培养36～48 h至菌体浑浊，制得活化种子液；所述的活化培养基（g/L）：蛋白胨5～10，酵母粉3～5，甘油20～25，粉末壳聚糖1～2，磷酸二氢钾2～3，硫酸镁2～3, 磷酸氢二钠2～3，pH 6.5；（2）固态发酵：按照5～10%（v/v）的接种量，将淡紫拟青霉YT08的活化种子液倒入固体发酵培养基中，机械搅拌使活化菌种与发酵培养基混匀；在30～32℃下静态培养，每隔3～5h时通入无菌空气1次；培养3～5d后至培养基表层长满菌丝，再次经过机械搅拌将培养基料捣碎混匀，在28～30℃下静态培养，每隔5～8小时通入无菌空气1次，继续培养3～4d后至培养基上长满淡紫色孢子后终止发酵；所述的固体发酵培养基为：干啤酒糟17～30%，麸皮4～8%，花生壳粉碎物3～6%，大豆蛋白胨2～5%，90%以上脱乙酰度的粉末壳聚糖2.55～7.5%，蟹壳粉1～2.25%，NaCl 0.2～0.5%，CaCl2 0.1～0.3%，MgSO4 0.1～0.3%，FeSO4 0.05～0.15%，含水量为40～70%；（3）发酵终止后将固体培养物打散混匀，置于阴凉通风处晾干，然后用粉碎机粉碎，即得农业根结线虫复合生防菌剂。