[发明专利]一种偶联抗体的合成、检测方法和应用在审
| 申请号： | 201510814932.4 | 申请日： | 2015-11-17 |
| 公开（公告）号： | CN105348393A | 公开（公告）日： | 2016-02-24 |
| 发明（设计）人： | 常婷;林宏;李柱一 | 申请（专利权）人： | 中国人民解放军第四军医大学 |
| 主分类号： | C07K19/00 | 分类号： | C07K19/00;G01N33/68;G01N33/53;A61K49/00;A61K38/17;A61K47/48;A61P37/02;A61P21/04 |
| 代理公司： | 暂无信息 | 代理人： | 暂无信息 |
| 地址： | 710038 *** | 国省代码： | 陕西;61 |
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| 摘要： | 本发明提供一种偶联抗体的合成和应用，公开了Hα1-210-DEC205偶联抗体合成方法：包括以下步骤：①Hα1-210蛋白表达、纯化、鉴定，②DEC-205单克隆抗体，③Hα1-210-DEC205偶联抗体合成；同时公开了Hα1-210-DEC205偶联抗体的体外细胞系实验方法和在体分析方法。本发明的有益效果是不降低机体免疫力的情况下，仅抑制针对AchR的异常免疫应答，起到治疗MG的作用。 | ||
| 搜索关键词： | 一种 抗体 合成 检测 方法 应用 | ||
【主权项】：
一种偶联抗体的合成方法，其特征在于：包括以下步骤：①Hα1‑210蛋白表达、纯化、鉴定：采用RT‑PCR的方法从表达人AchR的细胞系TE671中扩增AchRα1亚单位胞外段基因Hα1‑210，同原核表达载体pET16b连接，构建重组表达载体，转化BL21感受态菌，IPTG诱导表达；②DEC‑205单克隆抗体纯化：MiniPerm系统中连续旋转培养分泌DEC‑205，GL‑117单克隆抗体的大鼠杂交瘤细胞，培养上清超滤浓缩后经50％饱和硫酸胺沉淀，最后经蛋白A/G亲和层析柱纯化；③Hα1‑210‑DEC205偶联抗体合成：纯化后的抗体经2‑巯基乙胺·盐酸还原后，同异型双功能交联剂SMCC活化的Hα1‑210蛋白混合，4℃过夜连接。
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