[发明专利]一种快速鉴定腌渍绵蜇种属的方法有效
| 申请号： | 201510815437.5 | 申请日： | 2015-11-19 |
| 公开（公告）号： | CN105331712B | 公开（公告）日： | 2019-02-12 |
| 发明（设计）人： | 吴海涛;赵晨晨;王凤林;于翠平;唐越;孙娜;阎佳楠;石晓琳 | 申请（专利权）人： | 大连工业大学 |
| 主分类号： | C12Q1/686 | 分类号： | C12Q1/686 |
| 代理公司： | 大连格智知识产权代理有限公司 21238 | 代理人： | 刘琦 |
| 地址： | 116034 *** | 国省代码： | 辽宁;21 |
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| 摘要： | 本发明公开了一种快速鉴定腌渍绵蜇种属的方法，包括步骤：海蜇预处理，提取DNA，采用海蜇属16S rRNA基因通用引物，进行PCR扩增，利用限制性内切酶进行限制性片段长度多态性(RFLP)分析。本发明具有方法简单，效率高的特点，检测方便不费时，能快速确定市售腌渍海蜇的种属，为消费者的利益提供保障。 | ||
| 搜索关键词： | 一种 快速 鉴定 腌渍 种属 方法 | ||
【主权项】：
1.一种快速鉴定腌渍绵蜇的方法，其特征在于，具体步骤为：S1、将腌渍海蜇进行脱盐处理，6～18h换一次水，共换水3～8次，脱水后，将得到的海蜇贮存于终浓度为60～80v/v％乙醇溶液中，备存；S2、取步骤S1备存的海蜇组织100～200mg，剪碎，5000～10000rpm离心5～20min，取离心沉淀用无尘纸吸尽水分后，采用DNA提取试剂盒提取海蜇基因组DNA；S3、将步骤S2得到的基因组DNA采用16S rRNA基因通用引物进行PCR扩增，产物于‑20℃储存；所述16S rRNA基因通用引物为16SF和16SR引物，所述16SF和16SR引物序列分别为：16SF：5'‑TCGACTGTTTACCAAAAACATAGC‑3′，16SR：5'‑ACGGAATGAACTCAAATCATGTAAG‑3′；S4、步骤S3得到的PCR扩增产物分别采用HindⅢ、HpaⅠ、DraⅠ和XhoⅠ内切酶进行酶切处理，将得到的酶切产物用3w/v％琼脂糖凝胶电泳分离，成像检测，并将成像结果与已知绵蜇酶切产物的成像进行比对，进而实现快速鉴定腌渍绵蜇种属。
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