[发明专利]一种厌氧微生物的富集培养方法

摘要

本发明公开了一种厌氧微生物的富集培养方法。配置好培养基后加入刃天青作为氧化还原指示剂。将培养基放入高压灭菌锅内121℃灭菌20-30min，取出后放入超净工作台冷却至40-60℃备用。向经过处理后的培养基中加入除氧剂L-半胱氨酸及其钠盐。将生理盐水注射瓶中的生理盐水液用注射器针头抽空，用无菌水清洗4~6次，放在超净工作台中紫外灭菌20-30min，向注射瓶中注入培养基和接种样品，然后用注射器抽尽瓶中空气，充满高纯氮气，将生理盐水瓶放入恒温培养箱中37℃培养2~5天，即完成厌氧微生物的富集培养。本发明不需借助厌氧培养箱，方便快捷，成本低，能够保证全程无菌。

主权项

一种厌氧微生物的富集培养方法，其特征在于具体步骤为：(1)配置液体培养基溶液，并加入刃天青作为指示剂，当溶液中有溶解氧时显示蓝色或粉红色，无氧状态时显示无色；(2)将步骤(1)配置的培养基溶液放入高压灭菌锅内于121℃下灭菌20~30min，然后取出放入超净工作台冷却至40~60℃，再加入经过除菌及灭菌的除氧剂L‑半胱氨酸及其钠盐备用；(3)将生理盐水注射瓶中的生理盐水液用注射器针头抽空，所得空瓶用无菌水清洗4~6次，然后将清洗后的空瓶放在超净工作台中紫外灭菌20~30min，再向空瓶中注入接种样品和步骤(2)处理过的培养基溶液，接着用注射器抽尽瓶中空气后再充满高纯度氮气，密封状态下放入恒温培养箱中于37℃下培养2~5天，即完成厌氧微生物的富集培养；所述刃天青在液体培养基溶液中的质量百分比含量为0.1%；所述除氧剂L‑半胱氨酸及其钠盐在液体培养基溶液中的含量为0.3~0.5g/L；所述无菌水指的是超纯水或经高压蒸汽灭菌之后的水；所述接种样品的接种量为1~10%；所述高纯度氮气的纯度为99.999%。