[发明专利]一种抗手足口病药物活性检测方法及其试剂盒有效
| 申请号： | 201510822325.2 | 申请日： | 2015-11-23 |
| 公开（公告）号： | CN105255995B | 公开（公告）日： | 2019-02-05 |
| 发明（设计）人： | 萧伟;曹泽彧;丁玥;曹亮;李娜;丁岗;王振中 | 申请（专利权）人： | 江苏康缘药业股份有限公司 |
| 主分类号： | C12Q1/66 | 分类号： | C12Q1/66;C12Q1/37 |
| 代理公司： | 北京集佳知识产权代理有限公司 11227 | 代理人： | 赵青朵 |
| 地址： | 222047 江苏省连云港市经济*** | 国省代码： | 江苏;32 |
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| 摘要： | 本发明涉及医药技术领域，特别涉及一种抗手足口病药物活性检测方法及其试剂盒。该检测方法包括：将编码Gln‑Gly的核苷酸序列插入荧光素酶质粒，经体外非细胞转录翻译获得含Gln‑Gly的重组荧光素酶；体外重组表达手足口病毒蛋白酶，手足口病毒蛋白酶为2A或3C蛋白酶；手足口病毒蛋白酶与含Gln‑Gly的重组荧光素酶、受试物发生酶促反应，检测荧光素的生物发光强度，获得受试物的抗手足口病药物活性。本发明检测方法具有简单、微量、快速的优点，药物筛选工作量小，实验快速精确，实验结果重复性好，可用于抗手足口病药物的筛选与开发；本法基于萤光素酶的生物发光检测方法，灵敏度高，干扰因素少，受试品兼容性强。 | ||
| 搜索关键词： | 手足口病 蛋白酶 手足口病毒 药物活性检测 检测 荧光素酶 试剂盒 受试物 医药技术领域 荧光素酶质粒 核苷酸序列 干扰因素 酶促反应 生物发光 体外重组 细胞转录 药物活性 药物筛选 萤光素酶 灵敏度 兼容性 荧光素 可用 试品 体外 工作量 筛选 翻译 开发 | ||
【主权项】：
1.一种抗手足口病药物活性检测方法，其特征在于，包括如下步骤：将编码Gln‑Gly的核苷酸序列插入荧光素酶质粒，经体外非细胞转录翻译获得含Gln‑Gly的重组荧光素酶；体外重组表达手足口病毒蛋白酶，所述手足口病毒蛋白酶为2A或3C蛋白酶；在非细胞体系的、pH值为7～8的检测体系下，所述手足口病毒蛋白酶与所述含Gln‑Gly的重组荧光素酶、受试物发生酶促反应，检测荧光素的生物发光强度，获得所述受试物的抗手足口病药物活性；所述手足口病毒选自柯萨奇病毒A2、A4、A5、A7、A9、A10、A16型，柯萨奇病毒B1、B2、B3、B4和B5型，肠道病毒71型，以及埃可病毒。
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