[发明专利]用于膀胱癌检测的逻辑与门基因线路的构建方法在审
| 申请号： | 201510824077.5 | 申请日： | 2015-11-24 |
| 公开（公告）号： | CN105400816A | 公开（公告）日： | 2016-03-16 |
| 发明（设计）人： | 周庆;黄卫人;刘宇辰;周泽强;蔡志明 | 申请（专利权）人： | 深圳市第二人民医院 |
| 主分类号： | C12N15/85 | 分类号： | C12N15/85;C12Q1/68 |
| 代理公司： | 深圳鼎合诚知识产权代理有限公司 44281 | 代理人： | 向武桥 |
| 地址： | 518037 广东*** | 国省代码： | 广东;44 |
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| 摘要： | 本发明公开了一种用于膀胱癌检测的逻辑与门基因线路的构建方法，a)用PCR方法扩增序列：如SEQ ID NO:1所示的hUPII启动子序列，如SEQ ID NO:2所示的氨酰tRNA合成酶AcKRS基因序列，SEQ ID NO:3所示的hTERT启动子序列，如SEQ ID NO:4所示的tRNA序列，如SEQ ID NO:6所示的pCMV6-AC-GFP37TAG质粒序列；b)将所述hUPII启动子与AcKRS基因，所述hTERT启动子与tRNA分别连接到如SEQ ID NO:7所示的psiCHECK-2质粒中构建重组载体；c)将所述重组载体与所述pCMV6-AC-GFP37TAG质粒，共同转入膀胱癌细胞，构建出所述基因线路。当将上述基因线路转入膀胱癌细胞，并加入乙酰化赖氨酸时，绿色荧光蛋白只在膀胱癌细胞中表达，而在正常细胞中不表达。 | ||
| 搜索关键词： | 用于 膀胱癌 检测 逻辑 与门 基因 线路 构建 方法 | ||
【主权项】：
一种用于膀胱癌检测的逻辑与门基因线路的构建方法，其特征在于，a)用PCR方法扩增序列：如SEQ ID NO:1所示的hUPII启动子序列，如SEQ ID NO:2所示的氨酰tRNA合成酶AcKRS基因序列，SEQ ID NO:3所示的hTERT启动子序列，如SEQ ID NO:4所示的tRNA序列，如以SEQ ID NO:5所示的pCMV6‑AC‑GFP质粒序列为模板PCR扩增SEQ ID NO:6所示的pCMV6‑AC‑GFP37TAG质粒序列；b)将所述hUPII启动子与AcKRS基因，所述hTERT启动子与tRNA分别连接到如SEQ ID NO:7所示的psiCHECK‑2质粒中构建重组载体；c)将所述重组载体与所述pCMV6‑AC‑GFP37TAG质粒，共同转入膀胱癌细胞，构建出所述基因线路。
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