[发明专利]一种葱白多糖提取纯化方法

摘要

本发明公开了一种葱白多糖提取纯化方法，包括如下步骤：粉碎香葱葱白；加入无菌水混合并且煮沸；超声波提取多糖提取液；加入4-25℃食用酒精醇化，并且沉淀得到多糖液，再次加入4-25℃食用酒精沉淀多次得到粗多糖；浓缩、抽提后，加入体积1/3 的Sevag试剂进行脱蛋白，得到脱蛋白多糖液；继续浓缩醇化脱蛋白多糖液，并离心处理得到多糖；再一次加入蒸馏水混合，超滤膜得到分子量10000道尔顿以上的多糖组分；25度以下柱层析得到纯化多糖；冷冻干燥得到葱白多糖。本发明采取了水提醇沉法和膜分离技术的长处，摒弃了单一方法的高品质和低成本难以融合的缺点，该技术既能保持多糖结构破坏少、纯度高、提取率高、达到多级分离的效果，又能减少能耗降低加工成本。

主权项

一种葱白多糖提取纯化方法，其特征在于，包括如下步骤：（1）将干燥的香葱葱白进行粉碎并过筛，得到香葱葱白粉末；（2）取香葱葱白粉末，将香葱葱白粉末与无菌水以1:5‑1:8比例混合，加热煮沸2‑3小时，并辅以超声波辅助提取，至少离心10‑15分钟，取上清液；离心后的残渣按上述方法再提取至少3‑4次，上清液合并，得多糖提取液；（3）采用旋转蒸发仪在60‑80℃下将多糖提取液浓缩至原体积的1/4~1/7，得多糖浓缩液；（4）以4‑25℃食用酒精沉淀多糖浓缩液，使酒精含量达到总体积65‑80%，多糖以沉淀形式析出，水、部分杂质和色素溶解在酒精相中，至少离心10‑15分钟，取沉淀相，再用酒精溶解，重复醇沉至少2‑3次；（5）将醇沉粗多糖 充分溶于蒸馏水中，用Na2CO3 稀溶液调该粗多糖溶液的pH 值为4.5‑7.6，加入胰蛋白酶，甲苯体积1‑2%，35‑37℃恒温水解一定时间，旋转蒸发浓缩；（6）将蛋白酶解后的浓缩液加入占体积1/3 的Sevag试剂，抽提1‑3小时，离心10‑15分钟，取上清液；上清液继续用1/3体积的Sevag试剂进行脱蛋白，重复至少2‑3次；（7）将脱蛋白多糖液浓缩至原体积1/3‑1/4，4‑25℃醇沉24h以上，至少离心10〜15min，弃上淸液并室温挥发干乙醇，得到多糖；（8）用多糖质量5‑15倍的蒸馏水进行溶解，利用超滤膜将葱白多糖提取液进行超滤，收集分子量10000道尔顿以上的组分，再进行葡聚糖凝胶Sephadex G‑100于25度以下进行柱层析得纯化多糖，收集多糖组分，冷冻干燥，得到葱白多糖。