[发明专利]一种双特异性抗体活化的T细胞及制备方法与应用

摘要

本发明涉及一种双特异性抗体活化的T细胞及制备方法与应用，包括如下步骤：S1、取外周血进行离心，分离细胞和血浆，然后灭活血浆中的补体，收集细胞和血浆，备用；S2、将获得的细胞稀释成悬液，分离出单个核细胞，洗涤，备用；S3、将获得的单个核细胞加入无血清培养液中，加入双特异性抗体、靶细胞、细胞因子和血浆，随后按照常规方法进行孵育培养，收集培养的细胞，采用生理盐水离心洗涤，获得所述的双特异性抗体活化的T细胞；所述双特异性抗体具备活化T细胞的功能，双特异性抗体与T细胞表面抗原的解离系数大于1×10^‑7，与靶细胞表面抗原的解离系数小于1×10^‑9；双特异性抗体分子量为小于50KD；通过上述方法制备得到双特异性抗体活化的T细胞。

主权项

1.一种双特异性抗体活化的T细胞的制备方法，其特征在于，包括如下步骤：S1、取外周全血进行离心，分离所述外周全血中的细胞和血浆，然后灭活所述血浆中的补体，收集所述细胞和血浆，备用；S2、将所述步骤S1中获得的细胞稀释成悬液，分离出单个核细胞，然后洗涤，备用；S3、将所述步骤S2中获得的单个核细胞加入无血清培养液中，向所述无血清培养液中加入双特异性抗体、靶细胞、能够维持细胞生长、增殖和分化的细胞因子和所述步骤S1中收集的血浆，随后按照常规方法进行孵育培养，收集培养细胞，采用生理盐水离心洗涤，即得所述的双特异性抗体活化的T细胞；其中，所述双特异性抗体具备活化T细胞的功能，包含至少一个靶向T细胞抗原表位的结合位点和至少一个靶向靶细胞表面抗原表位的结合位点；所述双特异性抗体与所述T细胞抗原表位结合的解离系数大于1×10－7，与所述靶细胞表面抗原表位结合的解离系数小于5×10－9；所述双特异性抗体分子量为小于50KD；所述T细胞抗原为CD3；所述靶细胞表面抗原为CD19，所述靶细胞为灭活的B细胞。