[发明专利]一种应用于免疫检测的免疫磁珠及其制备方法

摘要

本发明涉及一种应用于免疫检测的免疫磁珠及其制备方法，本发明以聚苯乙烯为单体制备聚苯乙烯微球，以四水氯化亚铁和六水氯化铁为铁源制备四氧化三铁磁性纳米粒子，以四乙氧基硅烷为硅源制备PS@(Fe3O4)3@SiO2磁珠，与免疫配基生物活性物质偶联结合为免疫磁珠。本发明制备方法简单，成本低，磁珠大小可控，免疫磁珠检测灵敏度高。

主权项

一种应用于免疫检测的免疫磁珠的制备方法，其特征在于包括以下步骤：（1）带正电的聚乙酰亚胺修饰的聚苯乙烯微球的制备：以聚乙酰亚胺为稳定剂，乙醇为分散介质，偶氮二异丁氰为引发剂，将苯乙烯单体分散聚合为带正电聚乙酰亚胺修饰的聚苯乙烯微球；（2）带负电的柠檬酸修饰的四氧化三铁磁性纳米粒子的制备：在氮气气氛下，六水氯化铁和四水氯化亚铁溶于去离子水中，高温搅拌下加入氨水，柠檬酸钠水溶液，氮气冷却下制备出带负电柠檬酸修饰的四氧化三铁磁性纳米粒子；（3）磁性纳米粒子的合成：取步骤（1）的水溶液和步骤（2）的水溶液溶于去离子水中，采用磁力吸附，将吸附的沉淀分散到去离子水中，重复2‑3次，加入去离子水，乙醇，氨水，四乙氧基硅烷，室温下反应10‑15h，获得PS@ (Fe3O4)3@SiO2磁性纳米粒子；（4）免疫磁珠的合成：调节乙醇水溶液的pH至4.5‑5.5，加入步骤（3）的产物，加入硅烷偶联剂对其表面改性，室温反应12‑24h，溶解到pH为8‑9的缓冲溶液中，加入免疫配基生物活性物质，搅拌温育，用pH为7‑8的缓冲溶液磁力分离洗涤3次，保留上清液，加入牛血清蛋白或乙醇胺封闭，获得免疫磁珠。