[发明专利]一种高纯度京尼平的结晶方法

摘要

本发明公开了一种高纯度京尼平的结晶方法，先将京尼平苷与纤维素酶液发酵，再加入无水乙醇溶液混匀后，抽滤除去不溶物，滤液真空干燥后得到京尼平粗品，然后再用有机溶剂萃取，合并萃取液，用活性炭脱色后，浓缩至一定体积后置于常温下结晶，得到京尼平纯品。本发明达到了双重萃取的目的，京尼平萃取率增加，而且结晶得到的京尼平纯度也很高；利用有机溶剂来萃取京尼平粗品，然后结晶，它有很强的专属性，因此不会产生干扰；结晶条件是常温，也不会产生任何环境污染，操作简单。

主权项

一种高纯度京尼平的结晶方法，其特征在于包括以下步骤：（1）纤维素酶液的制备：将纤维素酶固体加入到pH为5.0～5.2的缓冲溶液中，使纤维素酶的浓度为4～10%，然后置于50℃下超声提取30min后，经抽滤得到酶液；（2）京尼平溶液的制备：按京尼平苷占酶液质量的2～5%，在京尼平苷中加入步骤（1）所得酶液，再置于50℃恒温水浴锅中，发酵反应1.5～2h，取出冷却后即得到京尼平溶液；（3）京尼平的粗分离：按无水乙醇与京尼平溶液的体积比为（1～2）:（1～2），在步骤（2）所得京尼平溶液中加入无水乙醇溶液中，使之充分混匀，然后经抽滤去除不溶物，得京尼平粗溶液，将其真空干燥得到京尼平粗粉末；（4）京尼平的萃取纯化：按京尼平粗粉末与有机溶剂的固液比g/mL计为1:（10～100）；将步骤（3）所得京尼平粗粉末加入有机溶剂中进行超声萃取数次，合并萃取液，再在萃取液中加入活性炭进行超声脱色，经过滤后，将滤液旋转蒸发浓缩至原滤液体积的3～5%，取出置于常温条件下进行结晶，即得到高纯度的京尼平。