[发明专利]一种透明质酸修饰的多级纳米颗粒及其制备与应用

摘要

本发明公开了一种透明质酸修饰的多级纳米颗粒，该多级纳米颗粒为一级以上的多层二氧化硅颗粒，具有粗糙表面，多级纳米颗粒的外表面由透明质酸修饰，多级纳米颗粒的粒径小于等于1mm；多级纳米颗粒为单层的一级二氧化硅颗粒、两层的二级二氧化硅颗粒、三层的三级二氧化硅颗粒和四层的四级二氧化硅颗粒中的一种或多种。本发明还公开了该多级纳米颗粒的制备方法以及其在生物样品的富集和质谱检测中的应用。该纳米颗粒制备成本低，可以大批量制作，合成步骤简单；该级纳米级的颗粒表面粗糙，相对表面积较大，并使用透明质酸修饰，能够去除生物样品(例如血清)中其它杂质蛋白的干扰。

主权项

1.一种透明质酸修饰的多级纳米颗粒的制备方法，其特征在于，所述制备方法包括以下步骤：步骤1、使用乙醇、氨水、TEOS制备不同粒径的一级二氧化硅颗粒，其中第一级二氧化硅颗粒的粒径范围为10‑60nm、第二级二氧化硅颗粒的粒径范围为100‑500nm、第三级二氧化硅颗粒的粒径范围为0.85‑3.5μm；步骤2、将步骤1中得到的所述一级二氧化硅颗粒在乙醇溶液中超声，直到所述一级二氧化硅颗粒分散均匀；步骤3、将步骤1中得到的所述第二级二氧化硅颗粒用3‑氨丙基三乙氧基硅烷在甲苯溶液中进行氨基化修饰，然后将氨基化修饰后的所述第二级二氧化硅颗粒与所述第一级二氧化硅颗粒加入超纯水中，并在20‑100摄氏度下反应12‑24小时，以制备二级二氧化硅颗粒；步骤4、将步骤1中得到的所述第三级二氧化硅颗粒和步骤3中得到的所述二级二氧化硅颗粒分别与3‑氨丙基三乙氧基硅烷在甲苯溶液中进行氨基化修饰，然后将氨基化修饰后的所述第三级二氧化硅颗粒与1‑(3‑二甲氨基丙基)‑3‑乙基碳二亚胺和N‑羟基琥珀酰亚胺加入到富马酸二甲脂溶液中，在20‑65摄氏度下反应2‑5小时，再加入氨基化修饰后的所述二级二氧化硅颗粒，在20‑65摄氏度下进行酯化反应，以制备三级二氧化硅颗粒；步骤5、将步骤4中得到的所述三级二氧化硅颗粒与3‑氨丙基三乙氧基硅烷在甲苯溶液中进行氨基化修饰，然后将氨基化修饰后的所述三级二氧化硅颗粒与丁二酸酐加入到富马酸二甲脂溶液中进行羧基化修饰，然后将羧基化修饰后的所述三级二氧化硅颗粒与1‑(3‑二甲氨基丙基)‑3‑乙基碳二亚胺和N‑羟基琥珀酰亚胺加入到富马酸二甲脂溶液中，在20‑65摄氏度下反应2‑5小时，再加入粒径范围为0.5‑1mm的玻璃颗粒进行酯化反应，制备四级二氧化硅颗粒；步骤6、将步骤1至5中得到的所述一级二氧化硅颗粒、所述二级二氧化硅颗粒、所述三级二氧化硅颗粒和所述四级二氧化硅颗粒分别与3‑氨丙基三乙氧基硅烷在甲苯溶液中进行氨基化修饰，然后将透明质酸与1‑(3‑二甲氨基丙基)‑3‑乙基碳二亚胺及N‑羟基琥珀酰亚胺加入到富马酸二甲脂溶液中，在20‑65摄氏度下反应2‑5小时，再加入氨基化修饰后的所述一级二氧化硅颗粒、所述二级二氧化硅颗粒、所述三级二氧化硅颗粒和所述四级二氧化硅颗粒进行酯化反应制备表面经所述透明质酸修饰的多级纳米颗粒。