[发明专利]一种硫酸酯化灰树花水不溶性多糖及应用

摘要

本发明涉及一种硫酸酯化灰树花水不溶性多糖，制备方法的步骤如下：以灰树花多糖为原料，用N,N-二甲基甲酰胺溶胀，加入三氧化硫三甲胺盐经水浴反应、冷却、离心、洗涤、透析制得。本多糖在一定浓度和时间范围内，S-GFP能显著提高RAW264.7细胞的增殖能力及吞噬活性，并呈剂量依赖，其最佳作用时间为36h，最佳作用剂量为40μg/mL；能激活RAW264.7细胞呈明显活化特征，同时增强细胞内核酸、糖原的代谢能力，显著提高了细胞酸性磷酸酶、溶菌酶和超氧化物歧化酶的分泌及活性；能在mRNA转录水平诱导上调RAW264.7细胞iNOS基因的表达，增加细胞NO的生成量，同时促进IL-2、IL-12、IFN-γ、IL-6等细胞因子的分泌，具有较高的免疫增强活性，可应用于制备增强免疫力的药物或保健品中。

主权项

一种硫酸酯化灰树花水不溶性多糖，其特征在于：制备方法的步骤如下：⑴以灰树花多糖为原料，将灰树花多糖用N,N‑二甲基甲酰胺溶胀，所述灰树花多糖与N,N‑二甲基甲酰胺的比例mg：mL为200‑300：1‑5mL，然后加入[(CH₃)₃N·SO₃]，所述灰树花多糖与[(CH₃)₃N·SO₃]的质量比为400‑600：1‑4，水浴50‑90℃搅拌反应5‑7h，得反应产物；⑵将反应产物冷却至室温，3000‑5000r/min离心弃上清，沉淀加入无水乙醇后3000‑5000r/min离心8‑15min，用乙醇离心洗涤多糖3次，直到[(CH₃)₃N·SO₃]的鱼腥味消除，得多糖沉淀物；⑶将获得的多糖沉淀物溶于蒸馏水中，用NaOH溶液调pH至7，4000r/min离心20min，得上清液；⑷将离心后得到的上清液装入透析袋，流水透析1‑3d、蒸馏水透析0.5‑1.5d，袋内透析液中加入乙醇，所述乙醇含量占加入乙醇后溶液总体积的75～80％，室温下静置10～12小时；在3000～5000转/分钟的转速下离心4～6分钟，收集沉淀，在40～55℃,0.07～0.09MPa的条件下干燥18～20小时，得硫酸酯化灰树花水不溶性多糖。