[发明专利]一种利用致病真菌防治外来杂草空心莲子草的方法

摘要

本发明公开了一种利用致病真菌防治外来杂草空心莲子草的方法，包括液体培养基的制备、链格孢菌培养、链格孢菌毒素的制备和链格孢菌毒素的应用，将制备的活性毒素配制成浓度为125～2000μg/mL的混合液，喷洒在空心莲子草上，在3天内使空心莲子草表现出明显的毒害症状，并杀死杂草，同时对大多数空心莲子草共生杂草具有毒杀效果。本发明方法液体培养操作简单、培养基质材料易获得、所需设备简单，所用毒素稳定性强，提取纯化工艺简单，可大批量生产；助剂对毒素具有较强的增效作用，以毒素作茎叶喷施，使用方便，既可有效杀灭目标杂草空心莲子草，同时也可兼顾杀灭大多数共生杂草，具有较高的环境安全性。

主权项

一种利用致病真菌防治外来杂草空心莲子草的方法，其特征在于，具体步骤如下：(1)液体培养基的制备①先采集新鲜的空心莲子草茎叶，冲洗干净，阴干去除茎叶表面的水分，剪碎成1～2cm的碎片，取200g，加适量的水，煮沸后，继续煎煮22～28min，经两层纱布过滤，得空心莲子草煎液；②添加葡萄糖20g，加水定容至1000mL；③分装至500mL三角瓶，每瓶300mL，在0.1MPa压力下灭菌24～26min；(2)链格孢菌培养在灭菌后的液体培养基中转接3块直径为0.8～1.2cm的链格孢菌饼于液体培养基中；培养温度为25±1℃，光照为L/D＝12:12，摇床振荡培养，转速为110rpm/min，培养时间为5～7d；(3)链格孢菌毒素的制备将培养后菌液经减压抽滤得滤液，滤液经大孔吸附树脂吸附，然后用体积浓度为90％的洗脱剂洗脱得洗脱液，并浓缩得棕色浸膏；浸膏经柱层析分离得活性毒素；(4)链格孢菌毒素的应用将分离的活性毒素加入水中进行配制，配制成浓度为125～2000μg/mL的混合液，并加入助剂，混合均匀后，喷洒在空心莲子草上，在3天内使空心莲子草表现出明显的毒害症状，并杀死共生杂草。