[发明专利]一种检测复方依山红提取物对HepG 2.2.15细胞的药效的方法在审

专利信息
申请号: 201510906005.5 申请日: 2015-12-09
公开(公告)号: CN105463052A 公开(公告)日: 2016-04-06
发明(设计)人: 庞宇舟;卢汝梅;霍丽妮;韦建华;李兵;梁迪 申请(专利权)人: 广西中医药大学
主分类号: C12Q1/02 分类号: C12Q1/02
代理公司: 北京远大卓悦知识产权代理事务所(普通合伙) 11369 代理人: 靳浩
地址: 530213 广西壮*** 国省代码: 广西;45
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摘要: 发明公开了一种检测复方依山红提取物对HepG 2.2.15细胞的药效的方法,所述检测方法包括以下步骤:制备复方依山红提取物溶液;将所述HepG 2.2.15细胞接种到RPMll640培养基中培养形成细胞悬浮液;通过测试所述溶液b的吸光值A及所述上清液a的吸光值A1,所述溶液d的吸光值A2及所述上清液c的吸光值A3来计算HepG 2.2.15细胞的存活率及不同浓度复方依山红提取物对HepG 2.2.15细胞分泌的HBsAg与HBeAg的抑制率;确定不同浓度复方依山红提取物对HepG 2.2.15细胞的药效;本发明能客观灵敏的反应复方依山红药效,且本发明的检测方法简单易操作,有利于检测的规范化。
搜索关键词: 一种 检测 复方 依山红 提取物 hepg 2.2 15 细胞 药效 方法
【主权项】:
一种检测复方依山红提取物对HepG 2.2.15细胞的药效的方法,其特征在于,所述检测方法包括以下步骤:1)、配置不同浓度的复方依山红提取物溶液;2)、将HepG 2.2.15细胞接种到RPM1‑1640培养基中培养形成细胞悬浮液;3)、依次将步骤1)中所述的不同浓度复方依山红提取物溶液分别加入到所述细胞悬浮液中,其中设有不加复方依山红提取物溶液的细胞悬浮液作为对照;4)、将步骤3)中加入了不同浓度复方依山红提取物的细胞悬浮液进行离心,分离上清液a后,加入染色剂染色,染色后用醋酸清洗,再加入碱缓冲溶液后成溶液b,最后测试所述溶液b的吸光值A及测试所述上清液a的吸光值A1;将步骤3)中不加复方依山红提取物的细胞悬浮液进行离心,分离上清液c后,加入染色剂染色,染色后用醋酸清洗,再加入碱缓冲溶液后成溶液d,测试所述溶液d的吸光值A2及测试所述上清液c的吸光值A3;5)、通过测试所述溶液b的吸光值A及所述上清液a的吸光值A1,所述溶液d的吸光值A2及所述上清液c的吸光值A3来计算HepG 2.2.15细胞的存活率及不同浓度复方依山红提取物对HepG 2.2.15细胞分泌的HBsAg与HBeAg的抑制率;确定不同浓度复方依山红提取物对HepG 2.2.15细胞的药效,其中所述HepG 2.2.15细胞的存活率=(A/A2)×100%,不同浓度复方依山红提取物对HepG 2.2.15细胞分泌的HBsAg与HBeAg的抑制率=(A1/A3)×100%。
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