[发明专利]一种同步检测三种柑橘病毒的RT-qPCR试剂盒

摘要

本发明公开了一种同步检测CYVCV、CTV和CTLV的实时荧光定量RT‑qRT试剂盒，包括如下3对病毒特异性RT‑qPCR引物：SEQ ID NO：1，SEQ ID NO：2，SEQ ID NO：3，SEQ ID NO：4，SEQ ID NO：5，SEQ ID NO：6。本发明通过一步RT‑qPCR反应可以实现CYVCV、CTV、CTLV的同步检测及病毒定量。本发明方法与常规RT‑PCR检测方法相比，提升了CYVCV、CTLV和CTV检测灵敏度100倍以上，检测时间节省3倍以上，污染几率降低30％以上，在诊断病害发生和监控病害流行及维护柑橘产业安全等方面具有良好的应用前景。

主权项

1.一种同步检测三种柑橘病毒的RT‑qPCR试剂盒，其特征在于，所述同步检测三种柑橘病毒的RT‑qPCR试剂盒对CYVCV、CTV、CTLV三种病毒的特异引物同管混合包装，CYVCV、CTV、CTLV三种病毒上下游引物浓度分别为：CYVCV1.3μM、CTV1.0μM、CTLV2.7μM；CYVCV、CTV、CTLV三种病毒扩增产物特征Tm值范围：CYVCV为86.25±0.35℃、CTLV为84.00±0.25℃、CTV为81.25±0.25℃；CYVCV、CTV、CTLV三种病毒特异性RT‑qPCR引物序列如下：CYVCV‑F：TCAAACCTCCAACGCACAAAC；CYVCV‑R：CATTGTTGTGGGTTTTTGCTTC；CTV‑F：GTGTGCAGATTTCTTGACCG；CTV‑R：TCCCAAGCTGCCTGACATT；CTLV‑F：AGTTTGGAAGACGTGCTTCA；CTLV‑R：TGCAGAGAAGAAGGTAAAGCTC。