[发明专利]一种大鼠肝S9的诱导及制备方法在审
| 申请号： | 201510907047.0 | 申请日： | 2015-12-07 |
| 公开（公告）号： | CN106834206A | 公开（公告）日： | 2017-06-13 |
| 发明（设计）人： | 田瑞;张亚洲;蒋敏;齐来俊 | 申请（专利权）人： | 江苏齐氏生物科技有限公司 |
| 主分类号： | C12N5/071 | 分类号： | C12N5/071;C07K14/47;C12N9/02 |
| 代理公司： | 暂无信息 | 代理人： | 暂无信息 |
| 地址： | 214400 江苏省江阴市东盛*** | 国省代码： | 江苏;32 |
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| 摘要： | 本发明提供一种大鼠肝S9的诱导及制备方法，包括步骤(a)挑选大鼠，按照大鼠的体重，用不同的方式和剂量腹腔注射两种诱导剂以确定最佳诱导方法；(b)处死大鼠，在无菌条件下，除去肝中残血，取出肝脏；(c)在无菌条件下，按一定的肝湿重比加入预冷的储存缓冲液中，充分剪碎，在冰浴中匀浆；(d)将匀浆好的组织液低速离心，收集上清和沉淀，并将上清高速离心收集上清，即首次获得肝S9；(e)将收集的沉淀，按一定的比重加入预冷的储存缓冲液，在无菌和冰浴条件下充分研磨并在不同条件下超声破碎细胞，将其在高速离心收集上清，即再次获得肝S9；(f)BCA法和CO还原法检测不同条件下肝S9蛋白以及酶含量；本发明提供的大鼠肝S9制备的方法不仅能够提高肝S9的产量并且显著提高了P450酶含量。 | ||
| 搜索关键词： | 一种 大鼠 s9 诱导 制备 方法 | ||
【主权项】：
一种大鼠肝S9的诱导及制备方法，其特征在于：(a)挑选大鼠，按照大鼠的体重，用不同的方式和剂量腹腔注射两种诱导剂以确定最佳诱导方法；(b)处死大鼠，在无菌条件下，除去肝中残血，取出肝脏；(c)在无菌条件下，按一定的肝湿重比加入预冷的储存缓冲液中，充分剪碎，在冰浴中匀浆；(d)将匀浆好的组织液低速离心，收集上清和沉淀，并将上清高速离心收集上清，即首次获得大鼠肝S9；(e)将收集的沉淀，按一定的比重加入预冷的储存缓冲液，在无菌和冰浴条件下充分研磨并在不同条件下超声破碎细胞，将其在高速离心收集上清，即再次获得大鼠肝S9；(f)BCA法和CO还原法检测不同条件下大鼠肝S9蛋白以及酶含量。
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