[发明专利]唐菖蒲伯克霍尔德菌的实时荧光PCR检测试剂盒和方法在审
| 申请号： | 201510909219.8 | 申请日： | 2015-12-10 |
| 公开（公告）号： | CN105368953A | 公开（公告）日： | 2016-03-02 |
| 发明（设计）人： | 吴兴海;吴振兴;郑媛;唐静;王昌军;高文娜;赵文军;陈长法;邵秀玲;肖西志;张云霞 | 申请（专利权）人： | 山东出入境检验检疫局检验检疫技术中心 |
| 主分类号： | C12Q1/68 | 分类号： | C12Q1/68;C12Q1/04 |
| 代理公司： | 济南泉城专利商标事务所 37218 | 代理人： | 刘帅帅 |
| 地址： | 266002 山*** | 国省代码： | 山东;37 |
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| 摘要： | 本发明公开了一种用于唐菖蒲伯克霍尔德菌的实时荧光PCR检测试剂盒和方法，检测试剂盒包括如下试剂：(1)2×PCR Master Mix；(2)上游引物；(3)下游引物；(4)Taqman探针。检测方法包括下列步骤：(1)待检菌株DNA的提取；(2)唐菖蒲伯克霍尔德菌的实时荧光PCR扩增；(3)应用荧光定量PCR仪随机软件，分析扩增结果。本发明适用于快速检测食品或者植物中的唐菖蒲伯克霍尔德菌，可广泛应用于农业生产及食品中的疫情监控及进出口贸易中该病原菌的监测及检测，操作极为简便，所需样品量小、要求较低。该引物和探针也可以试剂盒的形式和其他试剂一起提供，用于核酸扩增反应。 | ||
| 搜索关键词： | 唐菖蒲 霍尔 实时 荧光 pcr 检测 试剂盒 方法 | ||
【主权项】：
一种唐菖蒲伯克霍尔德菌的检测试剂盒，其特征在于：包括如下试剂：(1)2×PCR Master Mix包括0.05u/μL Taq DNA聚合酶，反应缓冲液，4mmol/L氯化镁，0.4mmol/L dNTP(dATP，dCTP，dGTP，dTTP)；其中反应缓冲液含有20mmol/LpH8.8的三羟基甲基氨基甲烷‑盐酸、100mmol/L氯化钾和2％曲拉通X‑100； (2)上游引物：10μmol/L，序列为：5′‑GTCTTGATAAGGCGGGGGTC ‑3′； (3)下游引物：10μmol/L，序列为：5′‑GCTTGACCCGAACGTTTGTC ‑3′； (4)Taqman探针：10μmol/L，序列为：5′‑TTGCAAGCAGGGGGTCGTCG ‑3′，其5′端标记FAM报告荧光集团，3′端标记TAMRA淬灭荧光集团。
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