[发明专利]一种分子改造肝靶向干扰素的方法及突变的肝靶向干扰素

摘要

本发明公开了一种分子改造肝靶向干扰素的方法及突变的肝靶向干扰素。突变的肝靶向干扰素的氨基酸序列如SEQ ID NO:2所示；突变的肝靶向干扰素的编码基因的核苷酸序列如SEQ ID NO:3或4所示。本发明重组突变肝靶向干扰素的活性为1×10⁹ IU/mg，显著高于原始肝靶向干扰素的活性（1.2×10⁸ IU/mg）。重组突变肝靶向干扰素每4000万IU中的内毒素含量小于0.25EU，远低于中国药典中规定的每300万IU应小于10EU。而且，重组突变肝靶向干扰素的活性明显强于普通重组突变干扰素。

主权项

一种分子改造肝靶向干扰素的方法，其特征在于，从氨基端开始，将11位氨基酸由丝氨酸突变成天冬酰胺、14位氨基酸由苏氨酸突变成丙氨酸、16位氨基酸由甲硫氨酸突变成异亮氨酸、26位氨基酸由亮氨酸突变成脯氨酸、37和102位氨基酸由甘氨酸突变成谷氨酸、44位氨基酸由甘氨酸突变成天冬氨酸、在44和45位之间插入天冬氨酸，45位氨基酸由天冬酰胺突变成赖氨酸、51位氨基酸由谷氨酸突变成谷氨酰胺、52位氨基酸由苏氨酸突变成丙氨酸、54位氨基酸由脯氨酸突变成丝氨酸、68位氨基酸由丝氨酸突变成苏氨酸、79位氨基酸由苏氨酸突变成天冬氨酸、85位氨基酸由酪氨酸突变成半胱氨酸、100位氨基酸由异亮氨酸突变成甲硫氨酸、103位氨基酸由颉氨酸突变成谷氨酸、104位氨基酸由甘氨酸突变成精氨酸、106位氨基酸由苏氨酸突变成甘氨酸、112位氨基酸由赖氨酸突变成天冬酰胺、113位氨基酸由谷氨酸突变成丙氨酸、120位氨基酸由精氨酸突变成赖氨酸、124位氨基酸由谷氨酰胺突变成精氨酸、131位氨基酸由赖氨酸突变成苏氨酸、151位氨基酸由苯丙氨酸突变成亮氨酸、160和163位氨基酸由丝氨酸突变成精氨酸。