[发明专利]一种在体外研究昆虫卵巢吸收外来微粒的方法有效
| 申请号： | 201510936494.9 | 申请日： | 2015-12-16 |
| 公开（公告）号： | CN105462910B | 公开（公告）日： | 2019-03-01 |
| 发明（设计）人： | 许益鹏;俞晓平;韩善捷;申屠旭萍;郝培应;付贤树;王正亮;刘光富;马正;张蓬军 | 申请（专利权）人： | 中国计量大学 |
| 主分类号： | C12N5/07 | 分类号： | C12N5/07;G01N21/64 |
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| 地址： | 310018 浙江省*** | 国省代码： | 浙江;33 |
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| 摘要： | 本发明公开了一种在体外研究昆虫卵巢吸收外来微粒的方法。该方法首先解剖虫体获得卵巢，置于细胞培养基中，之后在上述培养基中加入外来微粒，进行外来微粒和昆虫卵巢的共培养，最后在显微镜下观察外来微粒进入昆虫卵巢的情况。利用本方法，可以研究昆虫卵巢吸收外来微粒的位置特异性；并可将外来微粒作为共生菌的对照，从而为在体外研究昆虫共生菌经卵垂直传播机制提供实验对照。 | ||
| 搜索关键词： | 一种 体外 研究 昆虫 卵巢 吸收 外来 微粒 方法 | ||
【主权项】：
1.一种在体外研究昆虫卵巢吸收外来微粒的方法，其特征在于该方法包括以下操作步骤：（1）昆虫准备：用75%酒精对性成熟的雌成虫表面消毒5分钟后，再用无菌1×PBS清洗3遍，备用；（2）离体卵巢的获得：取步骤（1）的成虫，置于无菌的1× PBS中，用消毒过的显微解剖镊小心剖开虫体腹部，在尽量不破坏虫体肠道的情况下，获得卵巢，并用1×PBS清洗卵巢，之后将卵巢置于含有昆虫培养基的培养皿中；（3）外来微粒与卵巢共培养：将微米级的外来微粒加入到步骤（2）所述的含有卵巢的培养皿中，进行外来微粒与卵巢的共培养，培养温度为27℃，同时，以50转/分钟的速度旋转培养皿；（4）观察：外来微粒与卵巢共培养1天后，在倒置显微镜下，观察外来微粒进入卵巢的情况。（5）所述1× PBS为1×磷酸盐缓冲液，pH = 6.4。
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