[发明专利]心肌标志物的联合检测装置及其制备方法

摘要

本发明涉及一种心肌标志物的联合检测装置及其制备方法，属于医疗检测设备领域。由固相有高特异性MPO、cTnI、NT‑proBNP抗体和羊抗鼠IgG多克隆抗体的硝酸纤维素膜、吸附有胶体金标记MPO、cTnI和NT‑proBNP抗体的玻璃纤维、样品垫、吸水纸等其它辅料粘贴制成。采用多聚赖氨酸处理液对硝酸纤维素膜进行预处理，将MPO、cTnI和NT‑proBNP抗体先与二氧化硅纳米颗粒结合再吸附到硝酸纤维素膜上，并配制合适的喷金缓冲液和样品垫处理液，在保证免疫胶体金释放完全的基础上，有效的提高了反应的灵敏度，同样的阈值下，还可降低免疫胶体金的用量，节约成本，既能同时检测标本中MPO、cTnI和NT‑proBNP三种心肌标志物，又没有增加生产操作的复杂度。检测试纸灵敏度高、特异性强、操作简便省时、实用性强。

主权项

一种心肌标志物的联合检测装置的制备方法，其特征在于：包括如下步骤：（a）采用柠檬酸三钠还原法制备胶体金；（b）采用步骤（a）中制得的胶体金标记MPO、cTnI和NT‑proBNP抗体，获得免疫胶体金；（c）采用喷金缓冲液稀释步骤（b）的免疫胶体金获得免疫胶体金溶液，用免疫胶体金溶液喷涂于玻璃纤维垫，制得免疫胶体金玻璃纤维膜；（d）将硝酸纤维素膜用多聚赖氨酸处理液预处理后，喷点与二氧化硅纳米颗粒结合的MPO、cTnI和NT‑proBNP抗体作为检测线，喷点羊抗鼠IgG抗体作为质控线，制得免疫硝酸纤维素膜；所述的将硝酸纤维素膜用多聚赖氨酸处理液预处理是：用多聚赖氨酸处理液浸泡硝酸纤维素膜1 h，并慢速振荡摇晃，取出后用蒸馏水清洗3遍，最后在真空干燥箱中干燥；所述的二氧化硅纳米颗粒结合的MPO、cTnI和NT‑proBNP抗体是：以二氧化硅作为载体，分别取1 mL MPO、cTnI和NT‑proBNP抗体溶液，与乙醇和去离子水搅拌混匀，再加入定量氨水和0.3 mL正硅酸已酯，搅拌1小时后，补加剩余正硅酸已酯，持续搅拌，整个反应避光进行，分别以12000 rpm，8500 rpm和7000 rpm离心10分钟收集，无水乙醇、去离子水各洗2遍；所述的二氧化硅纳米颗粒制备方法：将2.48 mL体积分数25的氨水和43.2 mL无水乙醇混合于锥形瓶中，在35℃和超声条件下，以0.4 mL/min的速度滴入3.5 mL正硅酸乙酯，滴完后再超声3分钟，即可制得粒径120 nm均一的粒子，分别以12000 rpm，8500 rpm和7000 rpm离心10分钟收集，倒掉上清液，再加水超声分散，反复多次洗涤至近中性，最后用水定容至体积与刚制备好时的体积相同，存放待用；（e）将预处理的样品垫、步骤（c）制备的免疫胶体金玻璃纤维膜、步骤（d）制备的免疫硝酸纤维素膜、吸水纸依次粘贴在胶板上，切裁制得检测试剂条，最后将检测试剂条装入塑料外壳。