[发明专利]一种草莓专用抗重茬生物有机肥的制备方法

摘要

本发明属生物有机肥技术领域，为解决草莓重茬病的防治且同时提供草莓生物有机肥的问题，提供一种草莓专用抗重茬生物有机肥的制备方法。畜禽粪和食用菌栽培后的菌渣混合，用解淀粉芽孢杆菌JN2、沼泽红假单胞菌和黑曲霉发酵食用菌栽培后的菌渣和畜禽粪的混合物，为草莓专用抗重茬生物有机肥。JN2对草莓重茬病的主要病原菌有较强拮抗作用，有良好的纤维素降解作用，沼泽红假单胞菌增强植物养分吸收、解毒和刺激植物生长；黑曲霉分解纤维素。对草莓重茬病有较高的防效。具有养分多样性、均衡性和长效性的特点，利于菌群定殖和增殖。该生物有机肥是药也是肥，解决了重茬草莓的病害和肥力问题，质优价廉，有很好的应用前景和开发价值。

主权项

1.一种草莓专用抗重茬生物有机肥的制备方法，其特征在于：将畜禽粪和食用菌栽培后的菌渣混合，用解淀粉芽孢杆菌(Bacillus amyloliquefaciens)JN2、沼泽红假单胞菌（Rhodop seudanonas palustris）和黑曲霉( Aspergillus nige )发酵食用菌栽培后的菌渣和畜禽粪的混合物，即为草莓专用抗重茬生物有机肥，具体制备方法如下：（1）肥料混合：将食用菌栽培后的菌渣与牛粪按重量比1:1混合均匀，调整C/N比值为20~30，pH值调至中性，水分调节至55‑65%；（2）菌剂的制备：A.解淀粉芽孢杆菌(Bacillus amyloliquefaciens)JN2菌液的制备：4℃保存的解淀粉芽孢杆菌JN2接种于羧甲基纤维素钠液体培养基上37℃，100~150rpm摇床培养过夜，制备成种子液；将种子液按体积比1%~5%的接种量接种于发酵罐中灭菌的羧甲基纤维素钠液体培养基中，罐内压保持0.02‑0.04MPa，温度37℃，溶解氧1.8±0.2mg/L，转速150r/min，发酵培养两天，得到JN2发酵液，检测发酵液中有效活菌数为4×108cfu/mL；B.沼泽红假单胞菌（Rhodop seudanonas palustris）菌液的制备：GH培养基装满整支试管，将沼泽红假单胞菌菌种无菌条件接种于GH培养基中，温度30℃，光照强度5000Lx静置厌氧培养，至菌液变为深红色即得种子液；将沼泽红假单胞菌扩大培养，培养基和培养条件与制备种子液的方法相同；当菌液颜色变成深红色时，得到沼泽红假单胞菌发酵液，检测发酵液中有效活菌数为4×108cfu/mL；C.黑曲霉( Aspergillus nige )菌剂的制备：黑曲霉菌种接种于普通PDA固体培养基平板上，28℃温度倒置黑暗培养，待长出新鲜菌丝后，挑菌丝接种于马铃薯葡萄糖液体培养基中，28℃，100~150rpm摇床培养，待培养基中长出大量菌丝团后，即获得黑曲霉种子液；将小麦麸皮洒水拌匀，制成含水率55‑65%的麸皮培养基，110‑120℃高压灭菌后冷却，按每千克麸皮培养基接入150mL菌液的比例接入黑曲霉种子液，搅拌均匀，28℃静置培养至大量孢子产生时停止培养，将培养物置于30℃烘箱内烘干后即得黑曲霉菌粉；（3）接种微生物发酵：按每平方米混合肥料中接入10kg的比例向混合肥料中加入黑曲霉菌粉，拌匀后堆置发酵，当温度低于50℃时翻堆后继续发酵，发酵时间为30~45天；发酵完成后，按每平方混合肥料中接入10L的比例分别加入解淀粉芽孢杆菌菌液和沼泽红假单胞菌菌液，调整pH值为6~7，水分含量为55‑65%，搅拌均匀后，摊成15‑25cm的薄层进行第二次发酵，控制温度为25~30℃，发酵7~10天后，将其搅拌均匀风干至含水率≤15%，即得到草莓专用抗重茬生物有机肥；所述解淀粉芽孢杆菌(Bacillus amyloliquefaciens)JN2在中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心保藏，保藏编号为：CGMCC No:10677，保藏日期为：2015年4月1日，保藏单位地址：北京市朝阳区北辰西路1号院3号，中国科学院微生物研究所，邮政编码为100101。