[发明专利]悬浮细胞球免疫荧光染色方法及染色装置有效
申请号: | 201510951719.8 | 申请日: | 2015-12-17 |
公开(公告)号: | CN105424450B | 公开(公告)日: | 2018-12-18 |
发明(设计)人: | 杨学军;张辰;李涛;于圣平;刘波;周星辰 | 申请(专利权)人: | 天津医科大学总医院 |
主分类号: | G01N1/31 | 分类号: | G01N1/31 |
代理公司: | 天津市宗欣专利商标代理有限公司 12103 | 代理人: | 董光仁 |
地址: | 300052 *** | 国省代码: | 天津;12 |
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摘要: | 本发明公开了一种悬浮细胞球免疫荧光染色方法及染色装置,属于对测试用样品着色的方法,所述染色方法包括以下步骤:细胞球和培养基的分离、固定液固定、Triton X‑100通透细胞、封闭液封闭、抗目的蛋白的一抗工作液的加入、抗一抗的荧光二抗工作液的加入、DAPI染液染色细胞核。染色装置包括细胞小室和套装于细胞小室下端外部的染色套件。本发明悬浮细胞球免疫荧光染色方法具有高效、简便等优点,节约抗体用量,节约实验成本,节约人力和时间,在不改变免疫荧光染色基本原理、实验人员不需特别培训的基础上,得到准确可靠的实验结果,避免细胞球在实验操作过程中的丢失,提高实验的成功率,提高效率。 | ||
搜索关键词: | 悬浮 细胞 免疫 荧光 染色 方法 装置 | ||
【主权项】:
1.一种悬浮细胞球免疫荧光染色方法,其特征在于:所述染色方法包括以下步骤:(i)组合细胞小室(1)和染色套件(2),取细胞球悬液加入细胞小室(1),弃染色套件(2)内培养基,清洗细胞球;(ii)向细胞小室(1)中加入组织细胞固定液固定,弃染色套件(2)内液体,清洗细胞球;(iii)向细胞小室(1)中加入Triton X‑100通透细胞,弃染色套件(2)内液体,清洗细胞球;(iv)向细胞小室(1)中加入封闭液封闭,孵育,弃染色套件(2)内液体;(v)向细胞小室(1)中加入抗目的蛋白的一抗工作液,孵育,恢复至室温,回收染色套件(2)内一抗工作液,清洗细胞球;(vi)向细胞小室(1)中加入抗一抗的荧光二抗工作液,孵育,弃染色套件(2)内液体,清洗细胞球;(vii)向细胞小室(1)中加入DAPI染液染色细胞核,弃染色套件(2)内液体,清洗细胞球;应用于一种悬浮细胞球免疫荧光染色方法的染色装置,包括细胞小室(1),所述细胞小室(1)为上端敞口的圆台型结构,细胞小室(1)的底面为有机材料膜,还包括套装于细胞小室(1)下端外部的染色套件(2),染色套件(2)是中空且上端敞口的圆台型结构,中部形成内底(3),内底(3)为下陷的圆锥面;染色套件(2)的上端内径与细胞小室(1)下端外径紧配合;染色套件(2)采用具有韧性的材料制成。
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