[发明专利]拟海桑提取物的生物活性MTT测定方法

摘要

本发明涉及一种拟海桑提取物的生物活性MTT测定方法，步骤如下(1)取对数期肿瘤细胞，调整细胞悬液的浓度为200000个/mL，每孔200μL，加入96孔细胞培养板中；(2)在培养箱中培养4h(37ºC，5%CO2)；(3)待测样品分别设5个浓度梯度(每个浓度3个平行样)，同时设阴性、阳性对照，每孔加空白液或样品液2μL，培养72h；(4)每孔加入MTT液10μL，继续培养4h；(5)终止培养，离心8min(37ºC、2000r/min)，吸去孔内培养液；(6)每孔加入DMSO各100μL，于微量振荡器中振荡15min，直至结晶充分溶解；(7)酶标仪测定每孔在570nm处的吸光值(即OD值)。取三孔的平均OD值，按公式IR%=(OD空白对照-OD样品)/OD空白对照×100%计算样品对细胞增殖的抑制率(IR%)。本发明的方法简单快速、且检测结果可靠，适于推广应用。

主权项

一种拟海桑提取物的生物活性MTT测定方法，其特征在于，包括如下步骤：(1)取对数期肿瘤细胞，调整细胞悬液的浓度为200000个/mL，每孔200μL，加入96孔细胞培养板中；(2)在培养箱中培养4h(37ºC，5%CO2)；(3)待测样品分别设5个浓度梯度(每个浓度3个平行样)，同时设阴性、阳性对照，每孔加空白液或样品液2μL，培养72h；(4)每孔加入MTT液10μL，继续培养4h；(5)终止培养，离心8min(37ºC、2000r/min)，吸去孔内培养液；(6)每孔加入DMSO各100μL，于微量振荡器中振荡15min，直至结晶充分溶解；(7)酶标仪测定每孔在570nm处的吸光值(即OD值)，取三孔的平均OD值，按公式IR%=(OD空白对照‑OD样品)/OD空白对照×100%计算样品对细胞增殖的抑制率(IR%)。