[发明专利]一种猪胸膜肺炎放线杆菌外膜囊泡的制备方法及其疫苗有效
| 申请号： | 201510964760.9 | 申请日： | 2015-12-21 |
| 公开（公告）号： | CN105420161B | 公开（公告）日： | 2018-07-31 |
| 发明（设计）人： | 周俊明;祝昊丹;倪艳秀;何孔旺;俞正玉;茅爱华;吕立新;温立斌;张雪寒;李彬;郭容利;王小敏;汪伟;周萍;沈江萍 | 申请（专利权）人： | 江苏省农业科学院 |
| 主分类号： | C12N1/20 | 分类号： | C12N1/20;A61K39/02;A61P31/04;C12R1/01 |
| 代理公司： | 南京经纬专利商标代理有限公司 32200 | 代理人： | 张素卿 |
| 地址： | 210014 江*** | 国省代码： | 江苏;32 |
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| 摘要： | 本发明涉及一种猪胸膜肺炎放线杆菌外膜囊泡的制备方法及其疫苗，属生物技术领域。体外以铁离子限制的培养基培养猪胸膜肺炎放线杆菌shope菌株，经离心、0.22µm过滤处理后获取无细胞培养上清，继而超速离心制备出细菌释放的外膜囊泡，经过透射电镜观察可见大部分外膜囊泡直径50nm~100nm之间，以外膜囊泡作为亚单位疫苗二次鼻内免疫小鼠，外膜囊泡免疫小鼠长期增重及肺脏眼观形态与PBS免疫组无显著差异。同时实验表明外膜囊泡是一种高效免疫刺激物，不仅能够刺激小鼠血清产生高水平的IgG，而且在小鼠肺脏中产生高水平的IgA，有效的刺激了小鼠肺脏的黏膜免疫，显现出外膜囊泡作为亚单位疫苗较好的应用前景。 | ||
| 搜索关键词： | 种猪 胸膜 肺炎 放线 杆菌 外膜囊泡 制备 方法 及其 疫苗 | ||
【主权项】：
1.一种猪胸膜肺炎放线杆菌外膜囊泡的制备方法，其特征在于,包括如下步骤：a.体外培养猪胸膜肺炎放线杆菌至细菌对数期早期，在培养基中添加铁离子螯合剂二乙烯三胺五乙酸钙三钠盐水合物，形成铁离子限制环境后继续培养细菌，通过离心、过滤获取无细胞培养上清；b.对无细胞培养上清进行超速离心处理，制得猪胸膜肺炎放线杆菌释放的外膜囊泡。
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