[发明专利]一种酶法制备(R)-邻氯扁桃酸的方法及应用在审
| 申请号： | 201510978973.7 | 申请日： | 2015-12-23 |
| 公开（公告）号： | CN105349583A | 公开（公告）日： | 2016-02-24 |
| 发明（设计）人： | 皮金红;尹冬;赵涛涛;杨诗宏;夏静平;韩瑞;陈晨;马立新;张琦 | 申请（专利权）人： | 武汉武药制药有限公司 |
| 主分类号： | C12P7/42 | 分类号： | C12P7/42;C12N9/78;C12R1/19 |
| 代理公司： | 北京元周律知识产权代理有限公司 11540 | 代理人： | 潘欣欣 |
| 地址： | 435229 湖北*** | 国省代码： | 湖北;42 |
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| 摘要： | 本申请公开了一种酶法制备医药中间体(R)-邻氯扁桃酸的方法，利用基因工程和生物发酵的方法获得大量表达有腈水解酶的E.coli菌体，该菌体通过水解邻氯扁桃腈消旋体定向生产(R)-邻氯扁桃酸。该方法原料价格低廉，工艺简单，反应条件温和，能耗少，反应步骤少，反应中无传统的有毒试剂的参与，绿色无污染，制备的(R)-邻氯扁桃酸纯度和ee值均达到98％以上，达到了药物中间体的质量要求。 | ||
| 搜索关键词： | 一种 法制 扁桃 方法 应用 | ||
【主权项】：
一种酶法制备(R)‑邻氯扁桃酸的方法，其特征在于，该方法包括如下步骤：(1)通过基因工程的方法构建能表达腈水解酶的大肠杆菌菌种；(2)将步骤(1)获得的能表达腈水解酶的大肠杆菌菌种通过发酵扩增培养，通过离心收集静息细胞；(3)将收集的静息细胞、作为底物的5～40mmol/L的邻氯扁桃腈消旋体以及助溶剂加入pH＝7.0～9.0的缓冲液中，形成反应体系，在25～50℃的温度下反应将底物转化成(R)‑邻氯扁桃酸；(4)反应完后调节反应液至pH＝1～3，再用有机溶剂萃取出水相中的(R)‑邻氯扁桃酸，分离出有机溶剂后得到(R)‑邻氯扁桃酸的粗品。
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