[发明专利]转录因子GATA3调控鸡肠道内糖转运蛋白SGLT1和GLUT5表达的方法

摘要

本发明属分子生物学和基因工程技术领域，目的在提供转录因子GATA3调控鸡肠道内糖转运蛋白SGLT1和GLUT5表达的方法。对鸡小肠上皮细胞体外分离培养获得培养细胞，用生物信息学软件寻找SGLT1和GLUT5基因5′上游GATA3基因的结合位点，构建真核表达载体pcDNA3.1-GATA3，将真核表达载体转染鸡小肠上皮细胞，收集细胞获得cDNA，实时荧光定量PCR检测目的基因GATA3、SGLT1和GLUT5绝对表达量。为家禽营养和育种研究提供部分基因表达调控信息，为阐明糖代谢过程中各基因间互作机制提供理论依据，为培育具高饲料转化率遗传特性的优良鸡种提供分子水平的研究基础。为以提高饲料转化率为目的的选育实践提供理论参考。

主权项

一种转录因子GATA3调控鸡肠道内糖转运蛋白SGLT1和GLUT5表达的方法，其特征在于：首先对鸡小肠上皮细胞的体外分离培养及鉴定，获得培养细胞，然后利用生物信息学软件寻找SGLT1和GLUT5基因5¢上游GATA3基因的结合位点，构建转录因子GATA3的真核表达载体pcDNA3.1‑ GATA3，运用脂质体转染法将构建的真核表达载体pcDNA3.1‑GATA3转染鸡小肠上皮细胞，转染后收集鸡小肠上皮细胞并获得cDNA，最后利用实时荧光定量PCR检测cDNA中目的基因GATA3、SGLT1和GLUT5的绝对表达量。