[发明专利]一种使用GC-MS法测定茶叶中生物碱的方法

摘要

本发明属于茶叶的理化检验技术领域，具体说是一种使用GC-MS法测定茶叶中生物碱的方法，主要包括茶叶粉末中烟碱及次要生物碱（烟碱、降烟碱、麦思明、假木贼碱、新烟碱和可替宁）的测定，该方法是利用装有0.01%三乙胺/叔丁基甲醚溶液的离心管萃取茶叶中的烟碱类物质，利用气相色谱/质谱联用法（GC-MS）分析茶叶中烟碱类物质的方法。采用本发明方法检测茶叶中烟碱的含量，快速有效，前处理简单，平均相对标准偏差小于10%，各指标的平均回收率在86.2%~92.1%之间。具有快速准确、灵敏度高及重复性好的优点。

主权项

一种使用GC‑MS法测定茶叶中生物碱的方法，包括烟碱、降烟碱、麦斯明、假木贼碱、新烟碱和可替宁的测定，其特征在于：该方法具体包括以下步骤：1）萃取溶液的配制：配制浓度为0.01%三乙胺的甲基叔丁基醚溶液为萃取溶液；2）样品的处理：称取2 g茶叶末放入50 mL 离心管中，然后加入1.0~6.0mL10%的氢氧化钠溶液, 静置10 min，取10 mL 步骤1）所配的萃取溶液到离心管中，并加入200 μL的内标溶液，于旋涡混合器上以2000 rpm速度振荡1 min；取1.0 mL上清液于内含150 mg无水硫酸镁，50 mg PSA吸附剂，50 mg C18E吸附剂的2 mL净化离心管中，于旋涡混合器上以2000 rpm振荡2 min，以5000 rpm离心3 min，取上清液过0.22 μm有机相滤膜后，进GC‑MS检测；3）标准工作溶液制备：用萃取溶液配制六个不同浓度的均含有200μL内标溶液的烟碱系列标准溶液，浓度范围：1.144‑57.2 μg/mL，用萃取溶液配制六个不同浓度的均含有200μL内标溶液的降烟碱系列标准溶液，浓度范围：1.456‑72.8μg/mL，用萃取溶液配制六个不同浓度的均含有200μL内标溶液的麦思明、可替宁、假木贼碱、和新烟碱的混合标样系列标准溶液，各成分浓度范围：麦思明:0.792‑39.6μg/mL, 可替宁:1.264‑63.2μg/mL, 假木贼碱:1.376‑68.8μg/mL, 新烟碱:0.88‑44μg/mL；4）气相色谱/质谱联用法测定:利用气相色谱/质谱联用仪对标准工作溶液和样品处理液进行检测，气相色谱/质谱联用仪条件如下：色谱柱：熔融石英毛细管柱，30m x 0.25mm x 0.25µm，固定相：35%‑苯基‑甲基聚硅氧烷；载气：氦气，载气流速：1.0 mL/min；进样口温度：250℃；进样量3μL，分流进样，分流比5:1；采用程序升温方式：初始温度：100℃；初始时间：3min； 以8℃/min速率由100℃升至260℃，保持10min，总运行时间：33min；检测器：质谱检测器；溶剂延迟：8min；电离电压：70ev；离子源温度：230℃；传输线温度：280℃；扫描离子范围：33～400amu；质谱扫描方式：选择离子监测（SIM）；5）测定方法:以目标物的色谱峰面积对其相应浓度进行回归分析，得到标准曲线；对制备好的样品进行测定，测得检出目标物的色谱峰面积，代入标准曲线，分别得到样品中的烟碱、降烟碱、麦斯明、假木贼碱、新烟碱和可替宁的含量。