[发明专利]一种生产富硒冬虫夏草菌丝原料的方法

摘要

本发明公开了一种生产富硒冬虫夏草菌丝原料的方法，涉及食品微生物应用技术领域。利用一种冬虫夏草新菌株，在液态的加硒的和添加了半胱氨酸盐酸盐和叶绿素铜钠盐的米糠麸皮全料新培养基中发酵，生产富硒的冬虫夏草菌丝原料。本发明将低值的米糠麸皮转化成具有多种保健功能的品质较优的富硒冬虫夏草菌丝原料，对降低生产成本、低端资源高效合理利用、保护大众健康，都具有有益的社会和经济效果，因而具有实用性。

主权项

1.一种用诱变菌株生产富硒冬虫夏草菌丝原料的方法，其特征在于按照下述步骤进行：（1）将米糠和麸皮加所需量的水121℃灭菌30min，同时将一定浓度的亚硒酸钠溶液在另一容器中121℃灭菌30min；（2）将米糠和麸皮全料作为碳源、氮源直接用于冬虫夏草（Cordyceps sinensis）菌株 CCTCC NO: M 2015064发酵培养基，米糠使用量为3‑8g/100mL，麸皮的使用量为3‑8g/100mL，米糠和麸皮的总浓度为6‑8.4 g/100mL，添加磷酸二氢钾0.015‑0.27g/100mL，七水硫酸镁0.015‑0.27g/100mL ，半胱氨酸盐酸盐20‑50mg/100mL，叶绿素铜钠盐5‑10mg/100mL，pH自然，250mL摇瓶装料100mL，发酵罐装料率70‑75%，接种量8‑10%，培养温度20‑24℃，摇床转速150‑180r/min或发酵搅拌浆转速50‑150r/min，发酵2d后加入0.21‑1.33mg/100mL的灭菌的亚硒酸钠溶液，总发酵时间为5‑8d；（3）将液体培养所得的含少量的米糠麸皮的菌丝体经离心分离或离心过滤分离后，并用水洗涤两次，离心除水；（4）将所得湿菌丝体进行冷冻干燥，得到富硒菌丝粉成品；（5）所得发酵液经过滤除渣后取清液真空浓缩、喷雾干燥，得到发酵液中的干物质，可作为深度开发的原料使用；（6）所得菌丝粉研磨后用90℃热水浸提4h，过滤取清液，经脱蛋白、醇沉、离心分离后，采用苯酚硫酸法测定菌丝多糖；（7）所得发酵液经静置、脱蛋白、醇沉后取一定量的清液，采用苯酚硫酸法测定胞外多糖；（8）所得菌丝粉研磨后用90℃热水浸提4h，过滤取清液，经脱蛋白、活性炭去色素、醇沉、离心、浓缩即得虫草素粗品，纯化后采用高效液相色谱测定虫草素含量；（9）所得菌丝粉取一定量的样品用微波消解后，采用电感耦合等离子体质谱仪测定硒的含量；（10）参照GB/T5009.12、GB/T5009.11、GB/T5009.17铅、砷、汞的测定方法和GB/T18979黄曲霉毒素的测定方法，测定冬虫夏草冻干菌丝体粉中污染物铅、砷、汞和黄曲霉毒素的含量。