[发明专利]一种RNAi技术联合小剂量ALA诱导肿瘤细胞原卟啉IX积聚的方法

摘要

本发明公开了一种RNAi技术联合小剂量5‑氨基酮戊酸（ALA）诱导肿瘤细胞原卟啉IX（PpIX）积聚的方法，是在外源性添加小剂量ALA的同时，利用RNAi基因沉默技术抑制亚铁螯合酶（FECH）的表达，从而使得外源性ALA所诱导产生的内源性PpIX能够更有效地积聚在肿瘤细胞。本发明还提供了上述RNAi所用的三个双链siRNA片段，对FECH具有很高的沉默效率。利用本发明的方法和双链siRNA片段，可在只使用小剂量外源性ALA的情况下，即可获得大量的PpIX并使其积聚在肿瘤细胞，实现肿瘤病灶的标示，尤其是对于早期肿瘤的标示，具有显著的意义。

主权项

1.一种利用RNAi技术联合小剂量ALA诱导肿瘤细胞原卟啉IX积聚的试剂盒，其特征在于，包含有ALA和利用RNAi技术沉默抑制亚铁螯合酶FECH表达所需的试剂；该试剂盒的使用方法是在外源性添加小剂量ALA的同时，利用RNAi技术沉默抑制亚铁螯合酶FECH的表达，从而使得外源性ALA所诱导产生的内源性PpIX能够更有效地积聚在肿瘤细胞；其中，所述利用RNAi技术沉默抑制亚铁螯合酶FECH表达所用的双链siRNA的反义链的核苷酸序列与靶基因部分或全部互补，双链siRNA的正义链与反义链部分或全部互补；所述沉默抑制亚铁螯合酶FECH的表达是利用双链740FECH‑siRNA、1072FECH‑siRNA和3389FECH‑siRNA中的任一个或三者联用；所述双链740FECH‑siRNA、1072FECH‑siRNA和3389FECH‑siRNA的反义链的核苷酸序列分别与SEQ ID NO.1所示序列的740、1072、3389位开始的一段核苷酸序列互补；所述双链740FECH‑siRNA、1072FECH‑siRNA和3389FECH‑siRNA的核苷酸序列分别如SEQ ID NO.2～7所示。