[发明专利]一种依诺肝素钠精品的生产方法

摘要

本发明公开了一种依诺肝素钠的生产方法，本发明使用肝素钠粗品为原料，通过降解、还原、乙醇沉淀得到低分子肝素钠粗品，相对于使用肝素钠精品为原料，方法适用范围更广，更可以从源头控制依诺肝素钠精品的质量。本发明通过HPLC对层析前的低分子肝素钠粗品测试其分子量，准确定量到符合要求的低分子肝素钠精品液再通过氧化、除菌过滤、沉淀脱水在操作上实现了简化,在本公司实现了依诺肝素钠的工业化生产。

主权项

 一种依诺肝素钠精品的生产方法，其特征在于包括如下步骤： (1)肝素钠粗品用纯化水溶解，调节溶液pH至2.7‑3.0，加入亚硝酸钠搅拌15min后调节溶液pH至10.0‑10.4，得到降解液，向降解液中加入硼氢化钠搅拌≥15h，调节溶液pH至3.5‑4.0搅拌15min，调节溶液pH至7.2‑7.8，紫外灯照射降解液，后用乙醇沉淀脱水，真空干燥得到低分子肝素钠粗品；所述肝素钠粗品和纯化水投料比(W/V)为1.0：8.8‑9.2；所述肝素钠粗品和亚硝酸钠的投料比(W/W)为100：1.8‑2.4；所述亚硝酸钠和硼氢化钠的投料比(W/W)为1.0：0.4‑0.6； (2)将上述低分子肝素钠粗品用2％氯化钠溶液溶解后加入层析柱内，以2％氯化钠溶液匀速洗拓，HPLC检测分子量及分布，通过公式计算除去的大、小分子百分比数及相对应体积，收集符合要求的洗拓液并调节pH至7.2‑7.8，乙醇沉淀脱水，真空干燥得到低分子肝素钠精品； (3)将分次层析出的低分子肝素钠精品合并，测试其分子量及分布，如果小分子部分有偏差，可调节溶液pH至7.2‑7.8，加入乙醇沉淀对小分子片段进行调节，使其达到符合要求，把合格的低分子肝素钠精品加到氧化罐内中，加入纯化水和氯化钠，搅拌溶解； (4)调节低分子肝素钠精品溶液pH至10.0‑10.4，加入30％过氧化氢氧化4h，后调节pH至7.2‑7.8，加入无水亚硫酸钠，搅拌30min过滤得到依诺肝素钠溶液； (5)调节依诺肝素钠溶液pH5.0‑5.5，使其通过0.45μm和0.2μm滤膜除菌，除菌过滤后的依诺肝素钠溶液收集在洁净沉淀罐中； (6)除菌后的依诺肝素钠溶液用乙醇沉淀﹑脱水、真空干燥得到精品依诺肝素钠。