[发明专利]北美红杉离体生根培养方法

摘要

本发明涉及一种北美红杉离体生根培养方法，首先选取当年生的北美红杉枝条为材料，经过消毒、清洗后于MS培养基上长成无菌苗，然后将顶芽或腋芽作为外植体于增殖培养基中进行增殖培养，将增殖后的无菌苗进行生根培养，生根培养基为1/4MS+0.1～1.0 mg/L 吲哚丁酸+30 g/L蔗糖+7g/L琼脂粉，基部长出3~6条主根，主根长度均值达到4.5～6cm，最后将根系长度在3~6cm的组培苗进行炼苗与移栽。本发明培养方法简单，步骤易于操作，将北美红杉离体生根中壮苗的步骤提前到生根培养之前，有效的提高了组培苗移栽后的成活率，将生根培养基进行改良，能够加速北美红杉离体培养时的生根效率。

主权项

一种北美红杉离体生根培养方法，其特征在于：包括如下步骤：（1）无菌材料的获得：选取当年生的北美红杉枝条为材料，经过消毒、清洗后用无菌滤纸吸干多余水分后接种到MS培养基中，20～22天后腋芽长出无菌苗；（2）增殖培养：将无菌苗作为材料，切下顶芽或腋芽作为外植体，接种至增殖培养基上，所述增殖培养基的为MS+0.1～1.0 mg/L 6‑苄氨基腺嘌呤+0.1～1.0mg/L 萘乙酸+30 g/L蔗糖+7g/L琼脂粉，pH5.5～6，培养25～30天时间；（3）壮苗：将增殖的无菌苗切下后，移入壮苗培养基，壮苗培养基为MS+0.1~0.4萘乙酸，pH 5.5～6，培养2~3周，温度为16~25℃；（4）生根培养基的配制：将MS培养基中的大量元素、微量元素、肌醇、有机物的用量分别减至常规用量的1/4，配制成 1/4MS培养基；（5）生根培养：将壮苗后的组培苗接种到生根培养基上，生根培养基为1/4MS+0.1～1.0 mg/L 吲哚丁酸+30 g/L蔗糖+7g/L琼脂粉，pH5.5～6，12～16天后，基部长出3~6条主根，主根长度均值达到4.5～6cm；（6）炼苗与移栽：将高度在2~5cm，根系长度在3~6cm的组培苗进行炼苗，打开瓶盖3~7天，使其适应外界环境，3~7天后洗掉根部的生根培养基，用800～1000倍的多菌灵浸泡1~10min，移栽至大棚内，覆膜保湿，适度遮光。