[发明专利]一种造礁石珊瑚总RNA提取方法在审
| 申请号： | 201511018383.6 | 申请日： | 2015-12-28 |
| 公开（公告）号： | CN105420227A | 公开（公告）日： | 2016-03-23 |
| 发明（设计）人： | 胡思敏;许昌有;黄晖;刘胜 | 申请（专利权）人： | 中国科学院南海海洋研究所 |
| 主分类号： | C12N15/10 | 分类号： | C12N15/10 |
| 代理公司： | 广州科粤专利商标代理有限公司 44001 | 代理人： | 刘明星 |
| 地址： | 510301 *** | 国省代码： | 广东;44 |
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| 摘要： | 本发明公开了一种造礁石珊瑚总RNA提取方法。它是将超低温保存的新鲜采集的造礁石珊瑚样本利用无菌海水冲洗其体表去除体表附着的其他生物，经液氮研磨后用异硫氰酸胍裂解液裂解，使得造礁石珊瑚的RNA释放游离于异硫氰酸胍裂解液中，然后再提取造礁石珊瑚总RNA；所述的异硫氰酸胍裂解液含有体积分数为38％的酸性水饱和酚、0.8M硫氰酸胍、0.4M硫代氰酸氨、0.1M乙酸钠和体积分数为5％的甘油，其余为RNase-free水。本发明方法实现了对造礁石珊瑚总RNA的高质量提取，最大限度的减少造礁石珊瑚RNA量的降解，可用于造礁石珊瑚基因克隆、差异显示分析、分子杂交等各种分子生物学研究。 | ||
| 搜索关键词： | 一种 礁石 珊瑚 rna 提取 方法 | ||
【主权项】：
一种造礁石珊瑚总RNA提取方法，包括造礁石珊瑚的采集和预处理、用裂解液裂解造礁石珊瑚释放出RNA、添加氯仿沉降再取水相，然后在水相中加入异丙醇沉淀RNA，弃上清，在余下溶液中加入乙醇沉淀RNA，得到造礁石珊瑚总RNA，其特征在于，所述的造礁石珊瑚的采集和预处理是用无菌海水将造礁石珊瑚冲洗干净并将其表面的水吸干，然后在液氮中磨成粉末，得到造礁石珊瑚粉末；所述的用裂解液裂解造礁石珊瑚释放出RNA是将造礁石珊瑚粉末用异硫氰酸胍裂解液裂解释放出RNA；所述的异硫氰酸胍裂解液含有体积分数为38％的酸性水饱和酚、0.8M硫氰酸胍、0.4M硫代氰酸氨、0.1M乙酸钠和体积分数为5％的甘油，其余为无RNA酶的水。
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