[发明专利]一种鼠李糖苷酶的生产方法

摘要

本发明提供了一种鼠李糖苷酶的生产方法，包括以下步骤：(1)取细丽毛壳菌种接种于一级种子培养基中，培养得一级种子液；(2)将一级种子液接种于二级种子培养基中，培养得二级种子液；(3)将二级种子液接种于发酵培养基中，得到混合培养基，后添加蔗糖，流加鼠李糖，得到酶活达到500U/mL以上的发酵液；(4)将发酵液进行过滤，对滤液超滤浓缩，得到酶活达到1250U/mL以上的鼠李糖苷酶酶液；(5)将鼠李糖苷酶酶液以淀粉为载体，进行喷雾干燥，得到酶活达到3500U/mL以上的固体鼠李糖苷酶。上述鼠李糖苷酶的生产方法，工艺简单、操作容易、生产效率高，且生产的鼠李糖苷酶活力高，稳定性好，易于储存。

主权项

1.一种鼠李糖苷酶的生产方法，其特征在于，包括以下步骤：(1)取细丽毛壳菌种(Chaetomiumgracile)按5～20％的接种量接种于一级种子培养基中，在25～38℃培养10～30h，控制溶氧在60％以上，培养即得一级种子液；(2)将所述一级种子液按5～20％的接种量接种于二级种子培养基中，在25～38℃培养10～30h，控制溶氧在60％以上，培养即得二级种子液；(3)将所述二级种子液按5～20％的接种量接种于发酵培养基中，在25～38℃培养40～55h，控制溶氧在60％以上，得到混合培养基，后按每升混合培养基添加5～10g蔗糖的比例添加蔗糖，并开始按每升混合培养基流加橘皮苷0.5～5g/小时的比例添加橘皮苷，同时控制pH为4.5～5.5，培养70～96h后即得酶活达到500U/mL以上的鼠李糖苷酶发酵液，其中，所述发酵培养基的成分为：橘皮苷60～80g/L、酵母抽提物10～15g/L、氯化钠3～5g/L、磷酸二氢铵2～3g/L、硫酸镁0.5～1g/L、氯化锌0.2～0.5g/L、丙酸钙20～30g/L；(4)将所述鼠李糖苷酶发酵液进行过滤，除去菌体及其他微小颗粒，后对滤液超滤浓缩，直至得到酶活达到1250U/mL以上的鼠李糖苷酶酶液；(5)将所述鼠李糖苷酶酶液以淀粉为载体，进行喷雾干燥，即可得到酶活达到3500U/mL以上的固体鼠李糖苷酶；其中，步骤(1)中的所述一级种子培养基和步骤(2)中的所述二级种子培养基的成分都为：橘皮苷60～80g/L、酵母抽提物10～15g/L、氯化钠3～5g/L、磷酸二氢铵2～3g/L、硫酸镁0.5～1g/L、氯化锌0.2～0.5g/L、丙酸钙20～30g/L。