[发明专利]一种快速检测痰液中结核分支杆菌的试剂盒

摘要

本发明提供了一种快速检测痰液样本中结核分枝杆菌的试剂盒，试剂盒包括液化液、裂解液、探针溶液、终止液和固定液、载玻片、盖玻片。本发明通过对痰液样本进行液化处理后，经过细胞裂解、探针杂交、荧光固定等操作，利用荧光显微镜对结核分枝杆菌进行肉眼可见的观察、计数、分析等。本发明的试剂盒操作方法简单、程序简短、操作简便，检测结果特异性强、敏感度高、结果明晰、可信度高，可用于对痰液样本中的结核分枝杆菌进行直接、简便、有效的检测。

主权项

一种用于检测痰液中结核分枝杆菌的探针，其特征在于：所述探针为分子信标探针，该分子信标探针由茎环结构两部分组成，总长度25~50个碱基，其中中间的环序列部分与细菌中核糖体RNA（16s rRNA、23s rRNA等）序列相匹配，两端茎序列部分为5~10个碱基互补的DNA序列，分子信标探针的5'‑端用荧光基团标记，3'‑端用荧光淬灭基团标记，在常温、游离状态下分子信标探针可自动退火形成发夹结构，荧光基团与荧光淬灭基团由于距离较近而不发出荧光信号，只有当分子信标探针中环序列部分与靶序列特异性结合之后，荧光基团与荧光淬灭基团彼此分离，进而发出荧光信号；所述探针是通过核酸杂交的原理检测痰液中的结核分枝杆菌，结核分枝杆菌分子信标探针序列〈SEQ ID No.1〉为：5’‑TXR‑CACGCACGATACGGGCAGACTAGAGTACTGCAGTGCGTG‑DABCYL‑3’。