[发明专利]一种利用食药真菌发酵三叶青获得的组合物及其制备方法

摘要

本发明公开了一种利用食药真菌发酵三叶青获得的组合物及其制备方法，该组合物为三叶青发酵亚临界萃取物Ⅰ和链霉菌发酵产物Ⅲ，具有良好的降血脂功能。其制备包括：将巴西蘑菇液体种子液接入含有三叶青和白芨的三叶青固态发酵培养基中培养，然后置于交变磁场环境中再培养，得三叶青固态发酵产物，再经亚临界水萃取，得到三叶青发酵亚临界萃取物Ⅰ；将链霉菌种子液接入含有萃取剩余物Ⅱ的链霉菌液体发酵培养基中培养，得到链霉菌发酵产物Ⅲ；该方法能够有效地将三叶青中的营养成分和有效成分进行生物降解和利用、有助于提高最终产品中活性成分的含量和活性。

主权项

一种利用食药真菌发酵三叶青获得的组合物的制备方法，其特征在于，包括步骤：(1)取活化后的巴西蘑菇菌种接种到液体MRS培养基中培养2天‑8天，离心收集第一菌体；将第一菌体悬浮在含胆盐的液体MRS培养基中于18℃‑30℃孵育1h‑20h，离心收集第二菌体；将第二菌体经PBS缓冲液清洗干净后重新悬浮于液体MRS培养基中，震荡摇匀得到第二菌体液，将第二菌体液接种到含胆盐的液体MRS培养基中于18℃‑30℃再培养1天‑10天，得到巴西蘑菇液体种子液；(2)取活化后的链霉菌菌种接种到液体MRS培养基中培养3h‑30h，离心收集第三菌体，将第三菌体悬浮在含NaCl的液体MRS培养基中于20℃‑30℃孵育0.5h‑15h，离心收集第四菌体；将第四菌体经PBS缓冲液清洗干净后重新悬浮于液体MRS培养基中，震荡摇匀得到第四菌体液，将第四菌体液接种到含NaCl的液体MRS培养基中于20℃‑30℃培养3h‑30h，得到链霉菌种子液；(3)将步骤(1)的巴西蘑菇液体种子液接入三叶青固态发酵培养基中，在18℃‑30℃培养2天‑20天，然后置于交变磁场环境中再培养5天‑30天，培养产物经真空冷冻干燥、粉碎后得三叶青固态发酵产物；所述三叶青固态发酵培养基中含有三叶青和白芨；(4)将步骤(3)的三叶青固态发酵产物经亚临界水萃取，得到三叶青发酵亚临界萃取物Ⅰ，萃取后所剩的残渣经真空冷冻干燥后得到萃取剩余物Ⅱ；(5)将步骤(2)的链霉菌种子液接入链霉菌液体发酵培养基中，在20℃‑30℃培养10h‑120h，离心，得到链霉菌发酵产物Ⅲ，所述链霉菌液体发酵培养基中含有萃取剩余物Ⅱ；所述利用食药真菌发酵三叶青获得的组合物为三叶青发酵亚临界萃取物Ⅰ和链霉菌发酵产物Ⅲ。