[发明专利]一种提高内生真菌发酵产物中紫杉醇产量的方法有效
申请号: | 201511027713.8 | 申请日: | 2015-12-31 |
公开(公告)号: | CN105400842B | 公开(公告)日: | 2018-10-12 |
发明(设计)人: | 程俊文;贺亮;魏海龙;胡传久;方茹;李海波 | 申请(专利权)人: | 浙江省林业科学研究院 |
主分类号: | C12P17/02 | 分类号: | C12P17/02;C12R1/77 |
代理公司: | 浙江永鼎律师事务所 33233 | 代理人: | 郭小丽 |
地址: | 310023 浙*** | 国省代码: | 浙江;33 |
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摘要: | 本发明公开了一种提高内生真菌发酵产物中紫杉醇产量的方法,包括:将产紫杉醇内生真菌种子液接入含有曼地亚红豆杉和蜘蛛香的内生真菌固态发酵培养基中培养,然后置于交变磁场环境中再培养,得内生真菌固态发酵产物;再将产紫杉醇内生真菌种子液接入含有内生真菌固态发酵产物的液体发酵培养基中培养,得到内生真菌发酵终产物。该方法原料来源天然,对环境无污染,周期短,产率高,适于工业化生产,与普通内生真菌发酵产物相比,本发明方法内生真菌发酵产物中紫杉醇的产量明显提高。 | ||
搜索关键词: | 一种 提高 真菌 发酵 产物 紫杉醇 产量 方法 | ||
【主权项】:
1.一种提高内生真菌发酵产物中紫杉醇产量的方法,其特征在于,包括步骤:(1)取活化后的产紫杉醇内生真菌菌种接种到液体MRS培养基中培养4h‑6h,离心收集第一菌体;将第一菌体悬浮在含胆盐的液体MRS培养基中于20℃‑30℃孵育3h‑40h,离心收集第二菌体;将第二菌体经PBS缓冲液清洗干净后重新悬浮于液体MRS培养基中,震荡摇匀,在20℃‑30℃培养2天‑10天,得到产紫杉醇内生真菌种子液;(2)将步骤(1)的产紫杉醇内生真菌种子液接入内生真菌固态发酵培养基中,在16℃‑30℃培养3天‑30天,然后置于交变磁场环境中再培养5天‑20天,培养产物经真空冷冻干燥、粉碎后得内生真菌固态发酵产物;所述内生真菌固态发酵培养基中含有曼地亚红豆杉和蜘蛛香;(3)将步骤(1)的产紫杉醇内生真菌种子液接入液体发酵培养基中,调pH值为3‑7,在15℃‑25℃培养5天‑25天,离心,得到内生真菌发酵终产物;所述液体发酵培养基中含有内生真菌固态发酵产物。
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