[发明专利]可利霉素生物合成基因簇

摘要

本发明提供了可利霉素生物合成连锁基因簇，共有44个基因开放阅读框，核苷酸序列全长89315 bp，其中含有5个编码聚酮合酶，包括8个模块，37个结构域，以及与聚酮合成延长单位及修饰相关的orf有9个，与糖基合成相关的orf有16个，与糖基转移相关的orf有6个。通过基因簇序列信息和结构分析，可以进一步对其产生菌进行遗传操作，获得新型、更有效的抗生素，如通过基因操作来改变其PKS合成模块式结构、进行内酯环后修饰的改变、糖基因的置换或修饰，创造新的大环内酯类抗生素，也可以通过对抗性基因或调节基因的遗传操作，提高抗生素的产量本发明所提供的氨基酸序列，可以用来分离需要的蛋白质并可用于抗体制备。

主权项

1.一种可利霉素生物合成基因簇，其特征是，所述生物合成基因簇共有44个基因，具体为：1)聚酮合酶基因orf10‑14，共5个基因；2)与聚酮合成延长单位及修饰相关的基因orf1、orf4‑6、15、36‑39，共有9个基因；3)与糖基合成相关基因orf9、16‑22、24、26、28、29、33‑35、41，共16个基因；4)与糖基转移相关基因orf7、8、30‑32、40，共6个基因；5)与抗性相关基因orf3和25，共2个基因；6)与生物合成调控相关基因orf 2、23、27、42，共4个基因；7)外源引入的基因工程菌标记基因orf43和与之连锁的碳霉糖4”O‑羟基异戊酰转移酶基因orf44，共2个基因；其中，上述的核苷酸序列分别选自Seq.1中的orf1(1‑645)、orf2(1810‑1208)、orf3(3133‑2285)、orf4(3614‑4840)、orf5(4846‑5511)、orf6(7150‑5801)、orf7(8444‑7179)、orf8(9729‑8482)、orf9(10543‑9830)、orf10(16215‑10543)、orf11(21076‑16328)、orf12(32511‑21124)、orf13(38599‑32585)、orf14(52259‑38643)、orf15(53099‑54310)、orf16(54495‑54845)、orf17(54842‑56041)、orf18(56038‑56946)、orf19(56930‑57967)、orf20(57937‑60174)、orf21(60836‑61984)、orf22(62796‑62077)、orf23(63633‑65645)、orf24(67379‑66318)、orf25(69004‑67352)、orf26(69349‑70650)、orf27(72156‑70708)、orf28(72422‑73462)、orf29(74601‑73561)、orf30(74913‑76160)、orf31(76218‑77486)、orf32(77606‑78781)、orf33(78783‑79775)、orf34(79772‑80779)、orf35(82055‑80823)、orf36(83164‑82052)、orf37(84400‑83279)、orf38(84713‑84393)、orf39(85576‑84710)、orf40(85825‑87042)、orf41(87094‑87702)、orf42(89315‑88143)；且orf43和orf44与Seq1.不连锁。