[发明专利]一种头孢菌素C酰化酶固定化酶制备方法在审
| 申请号： | 201511033291.5 | 申请日： | 2015-12-31 |
| 公开（公告）号： | CN105543206A | 公开（公告）日： | 2016-05-04 |
| 发明（设计）人： | 汪本助;徐斌;穆晓玲;纪传侠;韩小芬 | 申请（专利权）人： | 安徽丰原发酵技术工程研究有限公司 |
| 主分类号： | C12N11/08 | 分类号： | C12N11/08;C12P35/02 |
| 代理公司： | 北京路浩知识产权代理有限公司 11002 | 代理人： | 王文君 |
| 地址： | 233030 *** | 国省代码： | 安徽;34 |
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| 摘要： | 本发明涉及一种头孢菌素C酰化酶固定化酶制备方法，所述方法包括以下步骤：(1)发酵培养头孢菌素C酰化酶生产菌并在发酵结束后收集获得发酵菌体；将发酵菌体与磷酸钾缓冲液接触混匀后进行破碎离心，收集离心上清液作为酶液；(2)在酶液中加入硫酸铝获得硫酸铝终浓度为0.001-0.01g/L的混合液1；将所述混合液1在40-50℃下加热30-60min后去除不溶物，获得混合液2；(3)将所述混合液2与载体在20-30℃下接触搅拌20-50h进行固定化反应获得固定化酶。利用本发明所提供的方法生产的头孢菌素C酰化酶固定化酶，最高可重复使用次数350次，最高酶活120U/g，经成本核算后可以进行大规模工业化生产，且能获得较高的经济效益。 | ||
| 搜索关键词： | 一种 头孢菌素 酰化酶 固定 制备 方法 | ||
【主权项】：
一种头孢菌素C酰化酶固定化酶制备方法，其特征在于，所述方法包括以下步骤：(1)发酵培养头孢菌素C酰化酶生产菌并在发酵结束后收集获得发酵菌体；将发酵菌体与磷酸钾缓冲液接触混匀后进行破碎离心，收集离心上清液作为酶液；(2)在酶液中加入硫酸铝获得硫酸铝终浓度为0.001‑0.01g/L的混合液1；将所述混合液1在40‑50℃下加热30‑60min后去除不溶物，获得混合液2；(3)将所述混合液2与载体接触搅拌进行固定化反应获得固定化酶。
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