[实用新型]一种永生化的鸭胚肝细胞系的制备方法和应用无效
| 申请号： | 201520018223.0 | 申请日： | 2013-12-19 |
| 公开（公告）号： | CN104726409A | 公开（公告）日： | 2015-06-24 |
| 发明（设计）人： | 张许科;孙进忠;白朝勇 | 申请（专利权）人： | 普莱柯生物工程股份有限公司 |
| 主分类号： | C12N5/10 | 分类号： | C12N5/10;A61K39/29;A61P31/14;G01N33/569;C12R1/91 |
| 代理公司： | 北京华夏正合知识产权代理事务所(普通合伙) 11017 | 代理人： | 韩登营 |
| 地址： | 471000 *** | 国省代码： | 河南;41 |
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| 摘要： | 本发明提供了一种永生化的鸭胚肝细胞系的制备方法，该方法包括：（1）用胰蛋白酶消化法消化鸭胚肝脏，培养该消化液，得到原代培养的鸭胚肝细胞；（2）采用脂质体转染法，将编码hTERT和Marker基因的真核表达质粒导入该原代培养的鸭胚肝细胞；（3）培养该转染的鸭胚肝细胞，用G418筛选该hTERT阳性克隆；（4）培养筛选的该hTERT阳性克隆，连续培养超过50代次，得到永生化的细胞系。该细胞系在体外传代50代以上仍有较好的活力，保持分裂增殖，不发生衰老和凋亡，是一种永生化的细胞系。该永生化的鸭胚肝细胞形态规则，培养条件简单、容易控制，使用方便，为研究鸭病，特别是研究鸭肝炎病毒提供了很好的载体。 | ||
| 搜索关键词： | 一种 永生 肝细胞 制备 方法 应用 | ||
【主权项】：
一种永生化的鸭胚肝细胞系的制备方法，所述方法包括：（1）用胰蛋白酶消化法消化鸭胚肝脏，培养所述消化液，得到原代培养的鸭胚肝细胞；（2）采用脂质体转染法，将编码hTERT和Marker基因的真核表达质粒导入所述原代培养的鸭胚肝细胞；（3）培养所述转染的鸭胚肝细胞，用G418筛选所述hTERT阳性克隆；（4）培养筛选的所述hTERT阳性克隆，连续培养超过50代次，得到永生化的细胞系。
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