[发明专利]利用单管添加方案的加标签的核酸的文库制备有效
申请号: | 201580046283.6 | 申请日: | 2015-06-25 |
公开(公告)号: | CN106795651B | 公开(公告)日: | 2020-05-22 |
发明(设计)人: | F·凯珀;戈登·卡恩 | 申请(专利权)人: | 伊鲁米那股份有限公司 |
主分类号: | C40B50/06 | 分类号: | C40B50/06 |
代理公司: | 北京安信方达知识产权代理有限公司 11262 | 代理人: | 李平;郑霞 |
地址: | 美国加利*** | 国省代码: | 暂无信息 |
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摘要: | 一种制备加标签的核酸片段的文库的方法,所述方法包括:使细胞群体与具有一种或更多种蛋白酶的裂解试剂直接接触,以生成细胞裂解物;使蛋白酶失活,以生成失活的细胞裂解物,和在其中靶核酸和转座子末端成分经历转座反应的条件下,将转座酶和包含转移链的转座子末端成分应用至失活的细胞裂解物。 | ||
搜索关键词: | 利用 添加 方案 标签 核酸 文库 制备 | ||
【主权项】:
一种制备加标签的核酸片段的文库的方法,所述方法包括:(a)使细胞群体与裂解试剂直接接触,以生成细胞裂解物,其中所述裂解试剂具有一种或更多种蛋白酶,并且其中所述细胞裂解物包含靶核酸;(b)使所述一种或更多种蛋白酶失活,以形成失活的细胞裂解物,以及(c)在其中靶核酸和转座子末端成分经历转座反应以生成混合体的条件下,将至少一种转座酶和包含转移链的至少一种转座子末端成分直接应用至所述失活的细胞裂解物,其中:(i)所述靶核酸被片段化,以生成多个靶核酸片段,且(ii)所述转座子末端成分的转移链被连接至多个所述靶核酸片段的每一个的5'末端,以生成多个5'加标签的靶核酸片段。
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