[发明专利]在相同的真核细胞产生宿主中发现和产生条件活性生物蛋白在审
申请号: | 201580047510.7 | 申请日: | 2015-09-03 |
公开(公告)号: | CN106795548A | 公开(公告)日: | 2017-05-31 |
发明(设计)人: | 杰·M·肖特 | 申请(专利权)人: | 生物蛋白有限公司 |
主分类号: | C12P21/00 | 分类号: | C12P21/00;C12P21/08;C12N15/80;C12N15/85;C12N5/0783;C07K16/28;C07K16/46 |
代理公司: | 北京路浩知识产权代理有限公司11002 | 代理人: | 张晶,王朋飞 |
地址: | 美国加*** | 国省代码: | 暂无信息 |
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摘要: | 本发明公开了一种通过下述步骤制备条件活性生物蛋白的方法选择一种野生型生物蛋白,使用一种或多种演变技术演变编码该野生型生物蛋白的DNA以产生突变DNA,在真核细胞产生宿主中表达该突变DNA以获得突变蛋白,在正常生理条件下和异常条件下对该突变蛋白和野生型蛋白进行测试,选择表现出以下特性中至少一种的条件活性突变蛋白(a)在正常生理条件下的测试中较野生型蛋白活性下降,以及(b)在异常条件下的测试中较野生型蛋白活性增强,以及在与表达步骤中使用的真核细胞产生宿主相同的真核细胞产生宿主中产生条件活性生物蛋白。 | ||
搜索关键词: | 相同 真核细胞 产生 宿主 发现 条件 活性 生物 蛋白 | ||
【主权项】:
一种制备条件活性生物蛋白的方法,所述方法包括:i.选择野生型生物蛋白;ii.使用一种或多种演变技术演变编码所述野生型生物蛋白的DNA以产生突变DNA;iii.在真核细胞产生宿主中表达所述突变DNA以获得突变蛋白;iv.在正常生理条件下和异常条件下对所述突变蛋白和野生型蛋白进行测试;v.从步骤(iii)中表达的突变蛋白中选择表现出以下特性中至少一种的条件活性突变蛋白:(a)在正常生理条件下的测试中较所述野生型蛋白活性下降,以及(b)在异常条件下的测试中较所述野生型蛋白活性增强;以及vi.在与步骤(iii)中使用的真核细胞产生宿主相同的真核细胞产生宿主中产生条件活性生物蛋白。
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