[发明专利]用于在核酸测定中改善解链分辨和多重性的探针有效

专利信息
申请号: 201580050926.4 申请日: 2015-08-11
公开(公告)号: CN106715720B 公开(公告)日: 2021-08-13
发明(设计)人: 斯科特·C·约翰逊;尼古拉斯·阿拉贝;道格·惠特曼 申请(专利权)人: 卢米耐克斯公司
主分类号: C12Q1/6818 分类号: C12Q1/6818;C12Q1/6823;C12Q1/6816
代理公司: 北京集佳知识产权代理有限公司 11227 代理人: 郑斌;彭鲲鹏
地址: 美国得*** 国省代码: 暂无信息
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摘要: 提供了用于检测和定量核酸的方法和组合物。在某些实施方案中,方法涉及使用包含在靶核酸分子的存在下对内切核糖核酸酶(例如,RNA酶H)切割易感的核糖核苷酸位置的可切割探针。实施方案的探针还可以包含与报告基团和/或淬灭部分连接的非天然核苷酸。
搜索关键词: 用于 核酸 测定 改善 解链 分辨 多重 探针
【主权项】:
用于检测靶核酸存在的方法,其包括:(a)使样品与第一可切割探针接触,所述探针从5’至3’包含(i)包含用报告基团‑淬灭基团对的第一成员标记的至少一个非天然核苷酸的第一序列区;(ii)第二序列区;(iii)为所述第二序列区的反向互补序列的序列;和(iv)包含与所述靶核酸第一链上的第一区互补的一个或更多个核糖核苷酸碱基的序列;(b)使所述可切割探针与内切核糖核酸酶接触,从而切割与靶核酸杂交的探针以形成截短的可切割探针;(c)使所述截短的可切割探针与其自身杂交以形成发夹探针;(d)在能够与所述第一序列区的所述至少一个非天然核苷酸碱基配对的用报告基团‑淬灭基团对的第二成员标记的非天然核苷酸的存在下延伸所述发夹探针;以及(e)通过检测所述可切割探针和所述发夹探针上标记物的信号改变来检测所述靶核酸。
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