[发明专利]用于稳定反式剪接的内含肽修饰的蛋白酶的方法和组合物

摘要

本发明描述了生产具有增强的可溶性的反式剪接的内含肽修饰的蛋白酶的方法和调节其活性的方法。本发明提供了具有增强的可溶性的内含肽修饰的蛋白酶和编码其的多核苷酸。本发明还描述了储存反式剪接的蛋白酶的方法。

主权项

一种内含肽修饰的蛋白酶，该内含肽修饰的蛋白酶包括：第一前体和第二前体：所述第一前体包括与反式剪接的内含肽的可溶性增强的N‑内含肽融合的靶蛋白酶的N‑外显肽，且N‑外显肽的羧基末端与可溶性增强的N‑内含肽的氨基末端融合；所述第二前体包括与靶蛋白酶的C‑外显肽融合的反式剪接的内含肽的可溶性增强的C‑内含肽，且可溶性增强的C‑内含肽的羧基末端与C‑外显肽的氨基末端融合；且在反式剪接之前所述第一前体与所述第二前体是分离的；其中，所述内含肽修饰的蛋白酶与所述靶蛋白酶相比具有增强的可溶性和降低的活性，且经所述内含肽修饰的蛋白酶的反式剪接以及N‑外显肽与C‑外显肽的融合，所述靶蛋白酶的活性恢复。