[发明专利]一种修饰模板双链多核苷酸的方法有效
申请号: | 201580062575.9 | 申请日: | 2015-02-18 |
公开(公告)号: | CN107109483B | 公开(公告)日: | 2021-07-20 |
发明(设计)人: | 詹姆斯·怀特 | 申请(专利权)人: | 牛津纳米孔技术公司 |
主分类号: | C12Q1/6806 | 分类号: | C12Q1/6806;C12Q1/6869 |
代理公司: | 北京同立钧成知识产权代理有限公司 11205 | 代理人: | 李艳;臧建明 |
地址: | 英国*** | 国省代码: | 暂无信息 |
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摘要: | 本发明涉及一种修饰模板双链多核苷酸的方法,特别是使用纳米孔测序进行表征的方法。该方法从模板产生多个经修饰的双链多核苷酸。然后可以表征这些经修饰的多核苷酸。 | ||
搜索关键词: | 一种 修饰 模板 多核苷酸 方法 | ||
【主权项】:
一种修饰模板双链多核苷酸的方法,包括:(a)使模板多核苷酸与MuA转座酶以及一群双链MuA底物接触,每个双链MuA底物包括(i)至少一个突出端和(ii)与包括所述至少一个突出端的链相对的链中的至少一个发夹环,使得转座酶将所述模板多核苷酸片段化并将底物连接到双链片段的一端或两端,从而产生多个片段/底物构建体;(b)使所述片段/底物构建体与聚合酶接触,使得所述聚合酶置换包括所述突出端的链,并用与包括发夹环的链互补的链替换它们,从而产生多个双链构建体,每个所述双链构建体包括模板多核苷酸的双链片段;和(c)分离所述双链构建体的两条链,并使用所述链作为模板以形成多个经修饰的双链多核苷酸,每个所述经修饰的双链多核苷酸包括由至少一个发夹环连接的两条互补链。
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